[发明专利]胶体金免疫层析法检测牛白血病抗体的试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种胶体金免疫层析法检测牛白血病抗体的试纸条的制备方法，包括牛 白血病病毒囊膜糖蛋白gp51体外表达、分离纯化，其特征是：构建重组原核表 达载体pET-32a-gp51，在大肠杆菌中诱导表达GP51重组蛋白；所述的GP51重 组蛋白是由PCR法从BLV-FLK DNA中成功扩增出牛白血病病毒囊膜糖蛋白gp51 基因，构建了gp51原核表达载体，重组蛋白主要以不溶性包涵体在大肠杆菌中 表达，表达的重组蛋白能被BLV阳性血清识别；经尿素变性和复性后，用Ni柱 纯化法获得单一的His-gp51融合蛋白条带，将纯化的His-gp51融合蛋白和羊抗 牛IgG点样于硝酸纤维膜上，分别作为捕获BLV抗体的检测线和捕获牛IgG的质 控线，将胶体金标记的羊抗牛IgG-Fc抗体吸附于玻璃纤维制成金标垫。