[发明专利]无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒及无机磷(磷酸根)浓度测定方法

权利要求书

1.一种利用酶循环扩增法、酶比色法及酶联法技术的无机磷(磷酸根)浓度测定方法，其方法原理如下：

磷酸根+腺苷二磷酸+草酰乙酸 丙酮酸羧化酶 腺苷三磷酸+

丙酮酸+二氧化碳

二氧化碳+乙酰磷酸+过氧化氢 丙酮酸氧化酶 磷酸根+

丙酮酸+氧+水

丙酮酸+精氨酸+还原型辅酶 章鱼碱脱氢酶

N2-(D-1-羧乙基)-L-精氨酸+辅酶+水

将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长340nm吸光度下降的程度/速度，测算出无机磷(磷酸根)的浓度大小测定结果。

2.一种无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒，主要成分包括：

缓冲液                  20——500mmol/L

稳定剂                  1——4000mmol/L

还原型辅酶              0.1——0.35mmol/L

丙酮酸羧化酶            1000——80000U/L

丙酮酸氧化酶            1000——80000U/L

章鱼碱脱氢酶            1000——80000U/L

腺苷二磷酸              1——50mmol/L

草酰乙酸                1——50mmol/L

乙酰磷酸                1——50mmol/L

过氧化氢                1——50mmol/L

精氨酸                    1——50mmol/L

试剂成分的浓度不一定只限于上述范围；在此范围内效果较好，在此范围外，试剂仍会反应作用。

其特征在于：试剂盒可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、丙酮酸羧化酶、丙酮酸氧化酶、章鱼碱脱氢酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、丙酮酸羧化酶、丙酮酸氧化酶、章鱼碱脱氢酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、丙酮酸羧化酶、丙酮酸氧化酶、章鱼碱脱氢酶组成。还原型辅酶、丙酮酸羧化酶、丙酮酸氧化酶、章鱼碱脱氢酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、丙酮酸羧化酶、丙酮酸氧化酶、章鱼碱脱氢酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、丙酮酸氧化酶、 章鱼碱脱氢酶组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、丙酮酸羧化酶组成。还原型辅酶、丙酮酸羧化酶、丙酮酸氧化酶、章鱼碱脱氢酶、腺苷二磷酸、草酰乙酸、乙酰磷酸、过氧化氢、精氨酸在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述无机磷(磷酸根)诊断/测定试剂盒，其特征在于：还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：硫酸铵(Ammonia Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。