[发明专利]一种多亚基蛋白的复性方法无效
申请号: | 200810124598.X | 申请日: | 2008-08-26 |
公开(公告)号: | CN101343311A | 公开(公告)日: | 2009-01-14 |
发明(设计)人: | 张建琼;孟凡岩;谢维;沈传来 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/14 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 叶连生 |
地址: | 211109江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多亚基 蛋白 复性 方法 | ||
1.一种二亚基蛋白的复性方法,其特征在于对由两个亚基组成的蛋白按如下 步骤进行复性:先通过基因工程技术将各亚基分别在表达性宿主菌中以包涵体形 式表达,收获包涵体蛋白;再通过稀释/透析复性法对其中一个蛋白亚基进行预 复性;然后进行二亚基蛋白的色谱复性,方法是首先将未进行预复性的另一个蛋 白亚基结合在色谱柱上,然后将含有预复性蛋白亚基的复性液上柱,并梯度性地 增加已预复性蛋白亚基的浓度,使结合在色谱柱上的蛋白亚基在复性的同时并与 已预复性的蛋白亚基结合而折叠成完整的蛋白质分子,最后经过洗涤后将复性后 的蛋白从色谱柱上洗脱下来。
2.根据权利要求1所述的二亚基蛋白的复性方法,其特征在于二亚基蛋白的 色谱复性时所采用的色谱柱为离子交换色谱柱、疏水相互作用色谱柱或亲和色谱 柱。
3.根据权利要求1所述的二亚基蛋白的复性方法,其特征在于二亚基蛋白的 一个蛋白亚基预复性方法中的色谱复性法所采用的色谱柱为离子交换色谱柱、疏 水相互作用色谱柱、亲和色谱柱或尺寸排阻色谱柱。
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