[发明专利]一种利用溴化己二甲胺提高基因转染猪皮转染效率的方法有效
申请号: | 200810126824.8 | 申请日: | 2008-06-24 |
公开(公告)号: | CN101613710A | 公开(公告)日: | 2009-12-30 |
发明(设计)人: | 魏泓;葛良鹏;刘志;吴军 | 申请(专利权)人: | 重庆宗申军辉生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/67 | 分类号: | C12N15/67;C12N15/861;A61F2/10 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张建山;逯长明 |
地址: | 400039重庆市北*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 溴化己 二甲 提高 基因 转染 猪皮 效率 方法 | ||
1.一种利用溴化己二甲铵提高基因转染猪皮转染效率的方法,其特 征在于包括如下步骤:
1)制备待转染的猪皮肤;
2)使用浓度为5000-15000μg/ml溴化己二甲铵对108PFU/ml含有 CTLA4Ig重组基因的Ad5重组腺病毒载体进行震荡混合,孵育后制备成转 染液;
3)将步骤2)制备的转染液对步骤1)制备的猪皮肤在CO2培养箱内 37℃转染1-3小时。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述猪皮肤是巴马香猪 皮肤。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述猪皮肤是小于6个 月猪龄的猪皮肤。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述猪皮肤是4-6月龄 的巴马香猪皮肤。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述猪皮肤的厚度为 0.1-1.0毫米。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤2)中所述孵育具 体为:4℃孵育10-20分钟。
7.权利要求1所述的方法,其特征在于步骤3)具体为:将步骤2) 制备的转染液按0.8-2.2ml/cm2的比例对步骤1)制备的猪皮肤在CO2培养箱内37℃转染1-3小时。
8.权利要求1所述的方法,其特征在于步骤3)具体为:将步骤2) 制备的转染液按1ml/cm2的比例对步骤1)制备的猪皮肤在CO2培养箱内 37℃转染2小时。
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