[发明专利]一种利用溴化己二甲胺提高基因转染猪皮转染效率的方法有效
| 申请号： | 200810126824.8 | 申请日： | 2008-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN101613710A | 公开（公告）日： | 2009-12-30 |
| 发明（设计）人： | 魏泓;葛良鹏;刘志;吴军 | 申请（专利权）人： | 重庆宗申军辉生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/67 | 分类号： | C12N15/67;C12N15/861;A61F2/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张建山;逯长明 |
| 地址： | 400039重庆市北*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 溴化己 二甲 提高 基因 转染 猪皮 效率 方法 | ||
1.一种利用溴化己二甲铵提高基因转染猪皮转染效率的方法，其特 征在于包括如下步骤：
1）制备待转染的猪皮肤；
2）使用浓度为5000-15000μg/ml溴化己二甲铵对108PFU/ml含有 CTLA4Ig重组基因的Ad5重组腺病毒载体进行震荡混合，孵育后制备成转 染液；
3）将步骤2）制备的转染液对步骤1）制备的猪皮肤在CO2培养箱内 37℃转染1-3小时。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述猪皮肤是巴马香猪 皮肤。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述猪皮肤是小于6个 月猪龄的猪皮肤。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述猪皮肤是4-6月龄 的巴马香猪皮肤。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述猪皮肤的厚度为 0.1-1.0毫米。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2）中所述孵育具 体为：4℃孵育10-20分钟。
7.权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3）具体为：将步骤2） 制备的转染液按0.8-2.2ml/cm2的比例对步骤1）制备的猪皮肤在CO2培养箱内37℃转染1-3小时。
8.权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3）具体为：将步骤2） 制备的转染液按1ml/cm2的比例对步骤1）制备的猪皮肤在CO2培养箱内 37℃转染2小时。
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