[发明专利]狂犬病毒抗原的制备方法

权利要求书

1.一种制备狂犬病毒抗原的方法，包括：将狂犬病毒的抗原基因或抗原基因的联 合表达组合分别克隆到杆状病毒运载载体中，构建得到转移表达载体；将构建得到转移表 达载体与杆状病毒DNA进行共转染以发生同源重组或转座，将狂犬病病毒的抗原基因或抗 原基因的联合表达组合分别转移到杆状病毒的基因组上获得重组杆状病毒；用重组杆状病 毒感染昆虫宿主或昆虫细胞；培养被感染的昆虫宿主表达相应的狂犬病抗原；收获并纯化 所表达的抗原，即得；所述的狂犬病毒的抗原基因是狂犬病病毒抗原蛋白G基因或狂犬病 病毒抗原蛋白N基因；所述狂犬病毒的抗原基因的联合表达组合为SEQ ID NO：5所示的核 苷酸序列。

2.按照权利要求1的方法，其特征在于：所述的杆状病毒运载载体选自pBM034， pBM93，AcRP23-lacZ，AcRP6-SC，AcUW1-lacZ，BacPAK6，Bac to Pac，Bacmid， BlucBacII(pETL)，p2Bac，p2Blue，p89B310，pAc360，pAc373，pAcAB3、pAcAB 4，PAcAS3， pAcC129，pAcC4，DZI，pAcGP67，pAcIE1，pAcJP1，pAcMLF2，pAcMLF 7，pAcMLF8， pAcMP1，pAcMP2，pAcRP23，pAcRP25，pAcRW4，pAcsMAG，pAcUW1，pAcUW21， pAcUW2A，pAcUW2B，pAcUW3，pAcUW31，pAcUW41，pAcUW42，pAcUW43，pAcUW51， pAcVC2，pAcVC3，pAcYM1，pAcJcC5，pBac1，pBac2，pBlueBacIII，pBlueBacHis，pEV55， mXIV，pIEINeo，pJVETL，pJVNhe1，pJVP10，pJVrsMAG，pMBac，pP10，pPAK1，pPBac， pSHONEX 1.1，pSYN XIV VI+，pSYNVI+wp，pSYNXIV VI-，pVL1391，pVL 1392，pVL 1393，pVL941，pVL 945，pVL 985，pVTBac，pBM030或pUAC-5。

3.按照权利要求1的方法，其特征在于：所构建的转移表达载体是pVL1393(G)、 pVL1393(N)或pVL1393(G-IRES-N)；或者所构建的转移表达载体是用IRES序列在昆 虫中同时进行狂犬病病毒抗原蛋白G基因和N基因的表达。

4.按照权利要求1的方法，其特征在于：所述的杆状病毒DNA选自BmNPV、 AcMNPV、ApNPV、HaNPV、HzNPV、LdMNPV、MbMNPV、OpMNPV、SlMNPV、SeMNPV 或SpltNPV。

5.按照权利要求4的方法，其特征在于：所述的BmNPV是Bm-NPV-ZJ8。

6.按照权利要求1的方法，其特征在于：所述的重组杆状病毒选自以下任意一种 重组病毒：(1)重组家蚕核型多角体病毒rBmNPV(G)；(2)重组家蚕核型多角体病毒 rBmNPV(N)；(3)重组家蚕核型多角体病毒rBmNPV(G-IRES-N)。