[发明专利]蛭弧菌微生态制剂的生产方法有效
申请号: | 200810145709.5 | 申请日: | 2008-08-11 |
公开(公告)号: | CN101338293A | 公开(公告)日: | 2009-01-07 |
发明(设计)人: | 李国保;乔彦良;崔增学 | 申请(专利权)人: | 崔增学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/63 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人: | 魏忠晖 |
地址: | 266071山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 弧菌 生态 制剂 生产 方法 | ||
1.一种蛭弧菌微生态制剂的生产方法,其特征在于,包含以下 步骤:
A.制备冻干宿主菌粉;
B.制备蛭弧菌培养基,所述的蛭弧菌培养基由以下成分组成: 0.004wt%~0.006wt%步骤A制备的冻干宿主菌粉,20mg/L~50mg/L 的氯化钙,20mg/L~50mg/L的氯化镁,加入磷酸缓冲液使培养基的 pH值保持在7.0~7.8,在100~105℃灭菌10~15min;
C.以2~5%的蛭弧菌种子接种于装有步骤B制备的蛭弧菌培养 基的发酵罐中,30~33℃通气培养20~24小时,即得蛭弧菌微生态 制剂。
2.如权利要求1所述的蛭弧菌微生态制剂的生产方法,其特征 在于:所述的宿主菌是大肠杆菌。
3.如权利要求1所述的蛭弧菌微生态制剂的生产方法,其特征 在于:所述的蛭弧菌种子的蛭弧菌菌数为1.0×107cfu/ml。
4.如权利要求2所述的蛭弧菌微生态制剂的生产方法,其特征 在于,步骤A采用以下步骤:以2~3%接种量接种宿主菌种子液于 含有2~3%蛋白胨、0.6~1.0%酵母粉、0.8~1.0%氯化钠灭菌后的培 养基的发酵罐中,通过发酵罐转数及通气量使发酵液中溶氧维持在 70~90%水平,通过盐酸及氢氧化钠溶液使发酵罐内pH保持在7.0~ 7.8之间,经20~24小时发酵得到宿主菌发酵液;离心发酵液获取宿 主菌泥,灭菌自来水清洗3次得宿主菌泥,于冷冻干燥机器中-20~ -15℃条件下冷冻干燥得到冻干宿主菌粉,保存备用。
5.如权利要求4所述的蛭弧菌微生态制剂的生产方法,其特征 在于:所述的宿主菌种子液的菌数大于1.0×108cfu/ml。
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