[发明专利]一种乳中α－酪蛋白含量的检测方法

权利要求书

1.一种乳中α-酪蛋白含量的检测方法，包括以下步骤：将需要检测 的乳样品与样品缓冲液进行混合处理，将混合处理之后的样品通 过毛细管电泳仪进行检测，其特征在于，所述样品缓冲液的配制 方法是：160mmol/L三甲基氨基甲烷缓冲液加40mmol/L3-吗啉代 丙烷磺酸、60mmol/L乙二胺四乙酸二钠、7mol/L尿素，处理样 品时再添加5ul/ml的β-巯基乙醇，甲基羟乙基纤维素0.05％，调 节pH值至8.5；所述毛细管电泳仪的检测参数为：检测温度 15-40℃，毛细管柱直径25-75μm、长度20-600mm，二极管阵列 检测器或紫外光检测器，压力进样或电动进样，压力为0-1psi， 进样时间1s-20s，检测温度为15-40℃，工作电压7-30kV。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在所述乳样品与 所述样品缓冲液进行混合处理前，将所述乳样品进行离心处理， 离心的条件为：转速2000-6000r/min、离心5-15min。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其中，所述离心的条件为：转 速4500r/min、离心时间10min。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在通过所述毛细 管电泳仪对所述混合处理之后的样品进行检测前，将所述混合处 理之后的样品以超声波清洗1-10min。

5.根据权利要求1-4之一所述的检测方法，其特征在于，在所述乳 样品与所述样品缓冲液进行混合处理的步骤中，取所述乳样品或 离心后的的上清液与所述样品缓冲液进行混合处理，乳样品的上 清液与所述样品缓冲液的混合比例为1∶(3-20)(v/v)。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，该方法进一步包 括如下步骤：1)将α-酪蛋白溶于所述样品缓冲液中，制备得到多 个不同含量α-酪蛋白的标准溶液，并对所述多个标准溶液通过所 述毛细管电泳仪分别检测得到α-酪蛋白含量与检测结果之间的标 准曲线；2)将通过所述毛细管电泳仪检测获得的所述乳样品的检 测结果与所述标准曲线比对，得到所述乳样品中α-酪蛋白的含量。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，在所述步骤1)中， 在所述样品缓冲液中溶解α-酪蛋白标准物质，配制成4mg/ml、 2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml的标准溶液。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述乳样品的上 清液或所述α-酪蛋白标准物质与所述样品缓冲液使用漩涡混合器 摇匀。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述毛细管电泳仪的检 测参数为：检测温度30℃，毛细管柱直径25-75μm、长度20mm， 压力进样，压力为0.5psi，进样时间5s-20s，工作电压15-25kV。

10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述毛细管柱为 涂层石英毛细管柱，所述工作电压为20kV；或所述毛细管柱为未 涂层石英毛细管柱，所述工作电压为25kV。