[发明专利]一种通量鉴定小麦高分子量麦谷蛋白亚基的方法

权利要求书

1.一组通量鉴定小麦高分子量麦谷蛋白亚基的引物，所述亚基为：Glu-A1位点的AxNull、 Glu-B1位点的Bx7^OE和Glu-D1位点的Dx5亚基，所述引物序列为：

AxNull    Forward：ACGTTCCCCTACAGGTACTA

          Reverse：TATCACTGGCTAGCCGACAA

Bx7^OE     Forward：CCACTTCCAAGGTGGGACTA

          Reverse：TGCCAACACAAAAGAAGCTG

Dx5       Forward：CGTCCCTATAAAAGCCTAGC

          Reverse：AGTATGAAACCTGCTGCGGAC。

2.一种利用权利要求1所述引物进行通量鉴定小麦高分子量麦谷蛋白亚基的方法，其特 征是：采用多重PCR体系，多重PCR反应体系总体积为25ul，包括不含Mg²⁺的PCR 缓冲液、1.5mM MgCl₂、200μM dNTP、1.5U的Taq酶和150ng的模板DNA，亚基 Bx7^OE、Dx5和AxNull特异分子标记的上下游引物分别为5pmol、5pmol、8pmol，热 循环条件为：95℃预变性5min，94℃变性30S，62℃退火30S，72℃延伸1min，8个循 环；然后94℃变性30S，58℃退火30S，72℃延伸1min，27个循环；最后72℃延伸10min， PCR产物用1.5％的琼脂糖凝胶电泳检测，Glu-A1位点为AxNull的材料均能产生920bp 的扩增条带，Glu-B1位点为Bx7^OE的材料均能产生844bp扩增条带，Glu-D1位点为Dx5 的材料均能产生476bp的扩增条带。

3.权利要求2所述的通量鉴定小麦高分子量麦谷蛋白亚基的方法在小麦品种改良中的应 用。