[发明专利]人干扰素α衍生物及其聚乙二醇化修饰物的制备和用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及人干扰素α衍生物及其聚 乙二醇化修饰物的制备和用途。

背景技术

人干扰素(interferon，简称IFN)是一类体内存在的具有广谱抗病 毒、抗增殖和免疫调节机能的活性蛋白质，是最早用于临床治疗的细胞 因子之一，人干扰素可分为三型，即人干扰素-α，人干扰素-β，人干 扰素-γ，还可根据各型IFN的氨基酸序列不同再分为若干亚型。经大量 临床研究证明，人干扰素-α是一种重要的抗肿瘤和抗病毒治疗药物。目 前我国在临床使用最广泛的主要是重组人干扰素α-1a、α-2a和α-1b。

目前已发现人干扰素α的I型家族有20多个基因成员，其中大部分 编码功能蛋白，彼此在核苷酸水平上有大约90％的同源性。人干扰素α由 165个氨基酸组成，分子量在19000道尔顿左右。现有的人干扰素α制剂 的临床治疗效果尚不理想，其抗病毒比活性仅为1×10⁸IU/mg，存在着大 剂量时副作用较大的缺点。

但是，无论是人干扰素α-2a、人干扰素α-1b和人干扰素α-1a， 作为蛋白质性药物，由于稳定性差，血浆清除率高，体内半衰期短，易 产生抗原抗体反应等，在临床治疗上受到很大限制。基因工程技术使大 规模合成人重组蛋白成为可能，很大程度上解决了异源蛋白引起的免疫 原性问题，却仍然无法克服血浆清除快和生物利用度低等缺点。这些缺 点造成的结果是：需频繁注射人干扰素才能达到有效的血浆治疗浓度； 而且，每次注射后均会导致血药浓度的较大波动，形成药物浓度的“峰 一谷”效应。这样就可能增加了治疗费用以及给药不便和不良反应的风 险。

聚乙二醇修饰蛋白质的技术是近十年来发展起来的一种用于改进蛋 白质类药物体内药动学性质的新技术。它是将活化的聚乙二醇分子(PEG) 键合到蛋白质分子表面上，从而影响蛋白质的空间结构，最终导致蛋白 质各种生物化学性质的改变，如：化学稳定性增加，抵抗蛋白酶水解的 能力提高，免疫原性和毒性降低或消失，体内半衰期延长，血浆清除率 降低等等。

PEG组分是由氧乙烯单体聚合而成的惰性长链的两性分子。现在已有 多种不同的PEG分子可供利用。被活化的PEG其活性功能基因可以被联 结到治疗分子的某特殊部位(比如氨基、巯基或其他亲核物质)。N末端 修饰则可获得高特异性修饰产物，可以有效控制修饰产物的纯度，使工 艺更简单并且产品质量也更易评价。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种新的人干扰素α衍生物，是通过对人 干扰素α进行修饰获得，该人干扰素α衍生物具有比活性高，抗病毒比 活性达5～10×10⁸IU/mg，比人干扰素α强5～10倍，以及聚乙二醇化修饰 率高的优势。

本发明的目的之二是提供一种人干扰素α衍生物的聚乙二醇修饰 物，是对本发明提供的人干扰素α衍生物进行定点修饰，获得高特异性 的人干扰素α衍生物的聚乙二醇修饰物，这种聚乙二醇修饰物具有生物 活性高和不含非N端修饰异构体的特点，以及体内半衰期延长，血浆清除 率降低等优点。

本发明的目的之三是提供上述人干扰素α衍生物的聚乙二醇修饰物 的制备方法。

本发明的目的之四是提供本发明的人干扰素α衍生物及其聚乙二醇 修饰物的制药用途。

本发明的技术方案如下：

人干扰素α衍生物，在人干扰素α的N末端接上3个氨基酸，其结 构式如下：

R3-R2-R1-interferon

式中，interferon为人干扰素α，人干扰素α的N末端连接的第一 位氨基酸R1为含硫氨基酸或甘氨酸；第二位氨基酸R2为芳香族氨基酸 或甘氨酸；第三位氨基酸R3为酸性氨基酸或甘氨酸。

其中，所述的人干扰素α，包括人干扰素α-2a(IFNα-2a)、人干 扰素α-1a(IFNα-1a)、人干扰素α-1b(IFNα-1b)。此外，还包括IFN α-2a、IFNα-1b、IFNα-1a三种蛋白的衍生物、类似物、生物活性或 药用活性片段。