[发明专利]6α-甲基泼尼松龙中间体的生物脱氢制备方法

权利要求书

1.一种甾体药物中间体1，2位的生物脱氢方法，以式（1）化合物为底物 采用简单节杆菌生物脱氢的方法得到式（2）化合物，

反应式如下：

R₁为H，OAc；

R₂为OH；或者R₂，R₃为双键或环氧；

R₄为H，α-OH，β-OH，或＝O；

R₅为H，CH₃或者＝CH₂；

其特征是：所述简单节杆菌保藏编号为AS 1.94*，化合物（1）选自

11β,17α-二羟基-孕甾-4-烯-3,20-二酮；

17α,21-二羟基-孕甾-4-烯3,11,20-三酮-21-醋酸酯；

17α-羟基-孕甾-4-烯-3,11,20-三酮

6α-甲基-11α,17α,21-三羟基-孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯；

11α,17α-二羟基-孕甾-4-烯-3,20-二酮；

6α-甲基-11α-羟基-孕甾-4,16-二烯-3,20-二酮；

11α-羟基-孕甾-4,16-二烯-3,20-二酮；

将式（1）化合物粉碎或以溶剂溶解，投入已培养好节杆菌的发酵罐中 进行生物转化，转化后提取得到脱氢物即化合物（2）。

2.一种甾体药物中间体1，2位的生物脱氢方法，以式（1）化合物为底物 采用简单节杆菌生物脱氢的方法得到式（2）化合物，

反应式如下：

R₁为H，OAc；

R₂为OH；或者R₂，R₃为双键或环氧；

R₄为H，α-OH，β-OH，或＝O；

R₅为H，CH₃或者＝CH₂；

其特征是：所述简单节杆菌保藏编号为AS 1.754，化合物（1）选自

11β,17α,21-三羟基-孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯；

11α,17α,21-三羟基-孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯；

11α-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮；

6α-甲基-11α,21-二羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮-2 1-醋酸酯；

6-次甲基-11α,17α-二羟基-孕甾-4-烯-3,20-二酮；

将式（1）化合物粉碎或以溶剂溶解，投入已培养好节杆菌的发酵罐中 进行生物转化，转化后提取得到脱氢物即化合物（2）。

3.如权利要求1或2所述的生物脱氢方法，其特征是：所述溶解底物的溶 剂选自甲醇、乙醇、四氢呋喃、二氧六环、DMF中的一种或几种，溶解 倍数为常温下能将底物溶解的最小倍数。

4.如权利要求1或2所述的生物脱氢方法，其特征是：所述的底物微粉化 为D₉₀≤10μm的微粒。

5.如权利要求1或2所述的生物脱氢方法，其特征是作为底物的化合物（ 1）的投料浓度为≤4％。

6.如权利要求1或2所述的生物脱氢方法，其特征是作为底物的化合物（ 1）的投料浓度为1％～3％，发酵温度为30℃～34℃，生物脱氢反应时 间为36～72小时。

7.如权利要求1或2所述的生物脱氢方法，其特征是所述的生物脱氢反应 采用以下发酵工艺

8.如权利要求1或2所述的生物脱氢方法，其特征是所述的生物脱氢所采 用的培养基采用以下配比：

斜面培养基：葡萄糖1.3%，酵母膏1.3%，琼脂2.0%，以及余量的蒸馏 水，pH7.0-7.2，用于斜面培养；

发酵培养基：葡萄糖1.0%，酵母膏0.16%，KH₂PO₄ 0.25%，玉米浆0.1% ，以及余量的蒸馏水，pH 7.0-7.2，用于一级、二级培养和最终的生 物脱氢反应中。