[发明专利]一种获取4型戊型肝炎病毒重组多肽的方法无效
| 申请号： | 200810155378.3 | 申请日： | 2008-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN101381731A | 公开（公告）日： | 2009-03-11 |
| 发明（设计）人： | 周乙华;潘金顺;吴超;庄辉 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12N15/51 | 分类号： | C12N15/51;C12N15/70;C07K14/08 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人： | 孙 鸥 |
| 地址： | 210008*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 获取 型戊型 肝炎 病毒 重组 多肽 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种获取4型戊型肝炎病毒重组多肽的方法，其步骤为
(1)采用Trizol抽提戊型肝炎患者血清中的总RNA，再利用RT-PCR技术分别扩增编码4型HEV ORF2的主要免疫表位多肽和截短多肽的基因片断；
(2)将扩增的基因片断插入表达载体pRSET-C；
(3)再将该载体转化BL21(DE3)plysS感受态细菌，在IPTG诱导下进行表达；
(4)采用Ni-NTA树脂层析纯化，最终获得高纯度的重组多肽；
其中，步骤(1)中所述的主要免疫表位多肽是SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的多肽，并且该多肽位于4型HEV ORF2的459-607位氨基酸；步骤(1)中所述的截短多肽为在4型HEV ORF2主要免疫表位区域的氨基端和羧基端分别截短13个氨基酸残基后形成的重组多肽，并且该多肽位于4型HEV ORF2的472-607位氨基酸或459-594位氨基酸。
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