[发明专利]一种鱼鳞胶原蛋白的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及肽或蛋白质的制备，尤其是一种从鱼鳞中制备胶原蛋白的方法。

背景技术

胶原蛋白，是一种重要的功能性蛋白质，具有很强的生物活性及生物功能，已被广泛应用于医药、食品、日用化工、生物合成等工业领域，如药用胶囊、手术材料、食用添加剂、化妆品等。目前，所应用的胶原蛋白多来自牛、猪及鸡等哺乳动物或家禽类动物的胶原蛋白组织提取物。近年来，牛的疯牛病，猪的口蹄疫及家禽类的禽流感等家畜、家禽类疫病接连发生，家畜、家禽类的胶原蛋白的安全性受到质疑，加上一些消费者使用家畜类胶原蛋白有过敏的倾向。因此，使用陆产动物所提取的胶原蛋白，存有安全上的隐忧。

鱼鳞是鱼真皮层的胶原质生成的骨质，学名为鱼鳞硬蛋白，其占鱼体重的2％～3％。鳞片外表上看是透明的，像花瓣，且边缘呈微小的卷曲，白色光泽，略带有鱼腥味，质地坚且柔软，含水量为16.4％～17.8％，并含有丰富的胶原蛋白。该类胶原蛋白中含有多种氨基酸，能提高人体细胞营养，促进皮肤和骨骼组织的新陈代谢，能使细胞变得丰满、完整，保持皮肤弹性与湿润，使皮肤更加润滑细腻，防止了其老化。另外，对预防骨质疏松症和风湿性关节炎、提高人体免役力、增强生命活力具有良好的作用。鱼鳞胶原蛋白与其他胶原蛋白比，其蛋白质易分解，容易被消化、吸收。人们服用后能增加血液中的氨基酸，同时又能促进胶原蛋白生成。

我国水产鱼类的年加工量较大，加工鱼类后的鱼鳞年产量已达30-50多万吨。如将何将这些鱼类加工后的下脚料变废为定、进一步提高其附加值成为人们一新的研究课题。如2007年1月3日公开的CN1888075A中国发明专利申请公开说明中公开了“一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法”、2008年2月20日公告的CN100370033C中国发明专利说明书中公开了“一种鱼鳞胶原蛋白生产工艺”、2007年6月27日公开的CN1986828A中国专利申请公开说明书中公开了一种“鱼鳞胶原蛋白及其制造方法”、2006年8月9日公开的CN1814782A中国发明专利申请公开说明书中公开了一种“利用酶工程技术从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白的方法”，上述公开文件中所公开的工艺方法均是采用生物酶技术将鱼鳞水解，再经过滤、浓缩、干燥得鱼鳞胶原蛋白，采用上述方法制得的着鱼鳞胶原蛋白存在着得率及纯度低的不足。

发明内容

为了克服现有技术中鱼鳞胶原蛋白的得率及纯度低的不足，提供一种能将鱼鳞变废为宝、工艺易操作、产品灰分含量少、得率及纯度高、营养流失少的鱼鳞胶原蛋白的制备方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种鱼鳞胶原蛋白的制备方法，其特征在于：经过下列工艺

a、鱼鳞的处理  选用新鲜的鱼鳞用清水冲洗，并在40—50℃温度条件下烘干，然后入高速组织捣碎机中粉碎；

b、脱脂、脱灰  将上述粉碎后的鱼鳞加入鱼鳞重量4％—20％的NaOH溶液浸泡24-56小时，去除鱼鳞中的脂类物质，用蒸馏水洗至中性；然后加入鱼鳞重量5％-20％的盐酸溶液浸泡12-36小时，脱去鱼鳞中的灰分，用蒸馏水洗至中性；

    

c、酶解  将上述脱脂、脱灰后的鱼鳞加入其重量5-10倍的水，用酸溶液调节pH值为2—4，然后加入鱼鳞重量1％—5％的胃蛋白酶，4-8℃低温下连续搅拌酶解4-10时，酶解结束后升温至80℃以上，保持15—20分钟进行灭酶；

d、提取  将上述制得的鱼鳞酶解液进行过滤，保存初提液；将提取后的残留物作为原料重复上述提取过程，将两次初提液混合，备用；

e、脱色  将上述胶原蛋白的初提取液加入其重量1％—2％的活性碳，在40-60℃搅拌15—20分钟，进行脱色；

f、盐析  将上述脱色后的提取液加入其重量5—15％的氯化钠至盐析过夜，采用离心方法分离收集沉淀，所得沉淀加入其重量5％—20％的乙酸溶解，得到蛋白液；

g、提纯  将上述制得的蛋白液移入透析袋，用蒸馏水透析3-5天，每天更换透析2—5次，进行脱盐，得到纯化的胶原蛋白液；

h、成品  将上述纯化后的胶原蛋白液采用冷冻干燥或者喷雾干燥，干燥后进行超微粉碎，得到胶原蛋白固体颗粒。

所述的脱脂、脱灰后的鱼鳞在酶解步骤中调节pH值所用的酸溶液为柠檬酸溶液或乙酸溶液。