[发明专利]人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒

权利要求书

1.一种人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒，包括盒体，设在盒体内的酶标板和设在盒体内的试剂；其特征在于：所述酶标板的各孔包被有捕获抗体即BNP—32肽单克隆抗体；所述试剂包括：辣根过氧化物酶标记的BNP特异的检测抗体，BNP-32肽系列标准液，阳性对照血清，阳性对照血清，样品稀释液，洗涤液，TMB显色液A和B，终止液。

2.如权利要求1所述的人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述的包被的捕获抗体是：Mab clone ab20984，抗体类型为IgG1，浓度为50ng/ml；对应于proBNP的77-108氨基酸片段。

3.如权利要求1所述的人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述的检测抗体是辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体BNP-MCAb-HRP，抗体类型为IgG2a，其稀释度为100ng/ml。

4.如权利要求1所述的人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述BNP-32肽系列标准液分别为1.28ng/mL、0.64ng/mL、0.32ng/mL、0.16ng/mL、0.08ng/mL、0.04ng/mL、0.02ng/mL七个梯度浓度。

5.如权利要求1所述的人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒，其特征在于：所述洗涤液为含有体积分数0.05％吐温-20的pH7.5、0.1mol/L磷酸盐缓冲液。

6.权利要求1所述的人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒在临床心血管病诊断及预后判断中的应用。

7.权利要求1所述的人脑钠素非竞争双抗体夹心法ELISA检测试剂盒在测定人血proBNP和/或BNP-32抗原中的应用。

8.如权利要求6或7所述试剂盒的应用，其特征在于：应用试剂盒进行检测的步骤是：将包被捕获抗体的浓度稀释为50ng/mL，包被条件为4℃湿盒内过夜，37℃反应1h；将包被的酶标板以3％BSA，37℃封闭1.5h；待测样本按1∶10常规稀释，与封闭后的酶标板37℃反应45min；然后与浓度为100ng/ml酶标BNP特异的检测抗体37℃反应1h；采用常规的TMB底物液，100μL/孔，37℃避光反应20min，加入常规终止液50μL/孔，终止反应，静置5min，置酶标仪上450nm处测各孔OD值，然后依据BNP-32肽标准品绘制标准曲线，求得待测样本的OD值所对应的浓度含量。