[发明专利]一种基于可视化蛋白芯片的食物过敏原检测方法无效
申请号: | 200810159242.X | 申请日: | 2008-11-19 |
公开(公告)号: | CN101738469A | 公开(公告)日: | 2010-06-16 |
发明(设计)人: | 林洪;李小燕;李振兴;张轶群 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N21/78 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 可视化 蛋白 芯片 食物 过敏原 检测 方法 | ||
1.一种基于可视化蛋白芯片的食物过敏原检测方法,包括如下的步骤:
1)以手动式点样仪在基片上点制3×3的矩阵。
2)待测抗原与预制好的蛋白芯片进行杂交,加入以辣根过氧化物酶(HRP)标记的待测蛋白的检测抗体;
3)加入沉淀型TMB(3,3’5,5-四甲基联苯胺)与蛋白芯片进行杂交,然后以H2SO4或水洗终止反应,检测样品点处的色素沉积。
2.根据权利要求1所述步骤1中的基片为表面铺有琼脂糖的玻片。
3.根据权利要求1所述步骤1中的点阵,水平方向点距为1250μm,竖直方向点间间距为750μm,点的大小为500-1000μm。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述HRP标记抗体方法参照文献(PAUL K.NAKANE AND AKIRA KAWAOI,THEJOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY,1974,22(12):1084-1091),HRP标记抗体的使用浓度为0.5-5ug/ml。
5.根据权利要求1所述的步骤3中的H2SO4浓度为2mol/L。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述待测蛋白为食物过敏原,所述能检测到待检蛋白的蛋白芯片含有该待检蛋白的抗体(兔抗)。
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