[发明专利]传染性胰脏坏死病毒的快速检测试剂盒及其检测方法无效
申请号: | 200810160607.0 | 申请日: | 2008-11-19 |
公开(公告)号: | CN101457260A | 公开(公告)日: | 2009-06-17 |
发明(设计)人: | 岳志芹;李琼;梁成珠;朱来华;邓明俊;张太翔;辛学谦;刘荭;肖西志;凌宗帅;郑小龙;张健 | 申请(专利权)人: | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 | 代理人: | 张中南 |
地址: | 266002*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 传染性 胰脏 坏死 病毒 快速 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种传染性胰脏坏死病毒的快速检测试剂盒,其特征在于试剂盒中包括试剂A-F:
试剂A:BstDNA聚合酶,8U/μL;
试剂B:逆转录酶,200U/μL;
试剂C:反应缓冲液,其中含有200mmol/LpH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mmol/L氯化钾、100mmol/L硫酸铵、80mmol/L硫酸镁和1%曲拉通X-100;
试剂D:环介导等温扩增混合液,其中含有4.0μL 2.5mmol/L dNTP、2.0μL 10mol/L甜菜碱、0.5μL200U/μL RNA酶抑制剂和5-6μL分子生物学级超纯水;
试剂E:引物混合液,其中含有2μL 20μmol/L正向内引物、2μL 20μmol/L反向内引物、1μL 5μmol/L正向外引物、1μL 5μmol/L反向外引物和1μL 20μmol/L环引物;其中引物序列分别如下:
正向内引物:5′-GGCCCCGTTCATTGACTGGATTTTGACAAGCCATACGTCCGC-3′;
反向内引物:5′-CGGAGGTACGAGATCGACCTCCTTTTCCCTCGTAGAGAGTGGTGAG-3′;
正向外引物:5′-CCAAAGGAGTCACAGTCCTG-3′;
反向外引物:5′-GTFGACGATGTCGGCGTT-3′;
环引物:5′-TGGGGTGTCTCGTCCTCTA-3′。
试剂F:荧光显色剂,成分为100×的荧光染料SYBR GREEN I。
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