[发明专利]表达牛干扰素(α、β或γ－干扰素)的重组新城疫LaSota弱毒疫苗株

权利要求书

1.一种表达编码牛干扰素的基因的重组新城疫LaSota弱毒疫苗。

2.根据权利要求1的重组新城疫LaSota弱毒疫苗，其中所述牛干扰素是牛α、β或γ-干扰素，优选所述牛α、β或γ-干扰素的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2和SEQ ID No.3所示，更优选编码所述牛α、β或γ-干扰素的基因如SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。

3.根据权利要求1的重组新城疫LaSota弱毒疫苗，其为rLBoIFN-α，rLBoIFN-β或rLBoIFN-γ。

4.根据权利要求1-3中任何一项的重组新城疫LaSota弱毒疫苗在制备牛干扰素中的应用。

5.一种生产权利要求1-3中任何一项的重组新城疫LaSota弱毒疫苗的方法，该方法包括：

(1)构建转录质粒，该转录质粒包括其中插入编码牛干扰素的基因的所述新城疫LaSota弱毒疫苗的基因组cDNA序列；

(2)构建一个或多个转录辅助质粒，该辅助质粒包括编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗的核蛋白(NP)的cDNA序列、编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗的磷酸蛋白(P)的cDNA序列、和编码所述新城疫LaSota弱毒疫苗的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列；

(3)将所述转录质粒和转录辅助质粒共转染所述新城疫LaSota弱毒疫苗复制许可的宿主细胞，培养转染后的宿主细胞；

(4)收获上清液，过滤后继续敏感细胞传代或接种鸡胚尿囊腔救获重组病毒株。

6.根据权利要求5的方法，其中所述转录质粒是pBRN-FL-BoIFNα、pBRN-FL-BoIFNβ或pBRN-FL-BoIFNγ。

7.根据权利要求5的方法，其中所述转录辅助质粒是质粒pBSNP、pBSP和pBSL。

8.根据权利要求5-7中任何一项的方法，其中所述宿主细胞是BHK-21。

9.根据权利要求5-7中任何一项的方法制备的重组新城疫LaSota弱毒疫苗，优选为rLBoIFN-α，rLBoIFN-β或rLBoIFN-γ。

10.一种生产牛干扰素的方法，该方法包括：

1)将根据权利要求1-3中任何一项的重组新城疫LaSota弱毒疫苗接种敏感细胞或接种鸡胚尿囊腔；

2)收获细胞上清液或鸡胚尿囊液。