[发明专利]一种用于口腔黏膜白斑组织的检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种用于口腔黏膜白斑组织的检测试剂盒，其特征在于由以下试剂组成：TRIZOL、氯仿、异丙醇、乙醇、Oligo(dT)₁₅、试剂I、试剂II、试剂III-a、试剂III-b、试剂III-c和试剂III-d，其中，试剂I由MgCl₂、Tris-HCl+KCl、无RNase的dH₂O、dNTP混合物、RNase抑制剂、AMV反转录酶组成；

试剂II由Tris-HCl+KCl、灭菌蒸馏水、Taq DNA聚合酶组成；

试剂III-a为基因GDF-15的PCR引物，试剂III-b为基因NF-1的PCR引物，试剂III-c为基因SOCS-3的PCR引物，试剂III-d为基因β肌动蛋白的PCR引物。

2.根据权利要求1所述的一种用于口腔黏膜白斑组织的检测试剂盒，其特征在于由下述配比的试剂组成：

试剂名称       浓度/纯度/说明            体积(μl)

TRIZOL         分析纯                    10000.00

氯仿           分析纯                    2000.00

异丙醇         分析纯                    5000.00

乙醇           75％(v/v)                 10000.00

Oligo(dT)₁₅    2.5pmol/μl               30.00

试剂I                                    510.00

试剂II                                   2340.00

试剂III-a                                10.00

试剂III-b                                10.00

试剂III-c                                10.00

试剂III-d                                30.00

以上所述试剂的量为10个样本反应；

试剂I的组分如下：

组成成分             浓度/纯度           体积(μl)

MgCl₂                25mmol/L            120.00

Tris-HCl(100mmol/L pH8.3)+KCl(500nmol/L) 60.00

无RNase的dH₂O                            225.00

dNTP混合物           A/T/C/G各10mmol/L   60.00

RNase抑制剂                              15.00

AMV反转录酶          5U/μl              30.00

总体积510.00μl； 

试剂II的组分如下：

组成成分            浓度/纯度             体积(μl)

Tris-HCl(100mmol/L pH8.3)+KCl(500nmol/L)  600.00

灭菌蒸馏水                                1725.00

TaqDNA聚合酶        5U/μl                15.00

总体积2340μl；

试剂III的组分如下：

                    基因        引物序列                  浓度(μmol/L)    体积(μl)

试剂III-a           GDF-15      CGCTCCAGACCTATGATGACTT    20               10

                                CCTTGAGCCCATTCCACA

试剂III-b           NF-1        GTCATTGCCTTCCGTTCC        20               10

                                CACCCAAAGACAACAAGAGC

试剂III-c           SOCS-3      CCCCAGAAGAGCCTATTACATC    20               10

                                AGGAACTCCCGAATGGGCCCCGGCA

试剂III-d           β-actin    AGCGCAAGTACTCCGTGTG       20               30

                                AAGCAATGCTATCACCTCC。