[发明专利]Asial型口蹄疫病毒感染性cDNA及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 200810171258.2 | 申请日： | 2008-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN101724636A | 公开（公告）日： | 2010-06-09 |
| 发明（设计）人： | 于力;王海伟;杨德成;涂亚斌;周国辉 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/42 | 分类号： | C12N15/42;C12N15/79;C12N7/00 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;费碧华 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | asial 口蹄疫病毒 感染性 cdna 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种Asial型江苏谱系口蹄疫病毒的全长感染性cDNA，其特 征在于：所述的全长感染性cDNA序列为SEQ ID NO：1所示的序列。
2.一种Asial型口蹄疫病毒反向遗传操作系统，由权利要求1 所述的Asial型江苏谱系口蹄疫病毒的全长感染性cDNA和表达T7 RNA聚合酶的真核表达载体所组成。
3.按照权利要求2所述的Asial型口蹄疫病毒反向遗传操作系 统，其特征在于所述的表达T7 RNA聚合酶的真核表达载体是 pT7RNAP，其构建方法包括：将T7 RNA聚合酶基因克隆到真核表达 载体pCDNA3.1中，并在该基因的5′端引入Kozak序列。
4.按照权利要求2或3所述的Asial型口蹄疫病毒反向遗传操 作系统，其特征在于：还包括一种检测表达T7RNA聚合酶的真核表 达载体是否表达以及所表达的酶是否具有转录活性的检测表达载体。
5.按照权利要求4所述的Asial型口蹄疫病毒反向遗传操作系 统，其特征在于：所述的检测表达载体是pT7-IRES-EGFP，其构建方 法包括：将FMDV的IRES和EGFP顺次克隆到原核表达载体PET-28a 中，并使EGFP受控于口蹄疫病毒的IRES元件下，即得。
6.权利要求1所述全长感染性cDNA在拯救口蹄疫病毒中的应 用，包括将所述的全长感染性cDNA和T7 RNA聚合酶的真核表达载 体共转染哺乳动物细胞，拯救得到口蹄疫病毒。
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