[发明专利]一种三聚氰胺或三聚氰酸的测定方法及它的试剂盒或试纸条

说明书

【技术领域】

本发明涉及医学、食品或环境检验与测定技术领域。更具体地，本发明涉及三聚氰胺或三聚氰酸的测定方法，还涉及三聚氰胺或三聚氰酸测定试剂盒或试纸条。

【背景技术】

三聚氰胺(melamine)简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺，分子式C₃N₆H₆或C₃N₃(NH₂)₃，分子量126.12，其机构式如下：

三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料。在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步地被羟基取代，首先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。三聚氰胺是一种重要的化工材料，三聚氰胺与醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，是建筑业中常用的防火材料，并用于生产塑料、厨房用具、防火纤维、商业滤膜、胶水和阻燃剂。三聚氰胺不是食品、饲料的生产原料，也不是国家允许使用的食品、饲料添加物。

早在2007年3月美国因宠物饲料致猫狗死亡而大量召回被三聚氰胺污染的宠物饲料，研究人员发现，这些召回的宠物食品在其小麦谷蛋白添加物中含有较高浓度的三聚氰胺。美国食品药品管理局调查显示，在召收的宠物食品、死亡动物的尿液晶体和肾脏细胞中都发现有三聚氰胺。

蛋白质主要由氨基酸组成。蛋白质平均含氮量约16％，而三聚氰胺的含氮量约66％。目前采用的蛋白质测定方法“凯氏定氮法”是通过测定样品中的含氮量来确定蛋白质含量的。由于现有食品和饲料蛋白质含量测定方法存在的这种缺陷，由于在植物蛋白粉和饲料中使测定蛋白质含量增加一个百分点，使用三聚氰胺的成本只是实际蛋白原料的1/5，于是一些人有意将三聚氰胺用作食品和饲料添加剂，以便在食品和饲料质量检测中抬高蛋白质含量，欺骗国家质检部门和消费者。

三聚氰胺是一种白色结晶粉末，没有气味和味道，所以掺杂后不易被发现。

目前检测三聚氰胺的方法有气相色谱-质谱法、超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法、反相高效液相色谱法、高效液相色谱-二极管阵列法、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-四极杆质谱联用、固相萃取与高效液相色谱联用、液相色谱串联质谱法(LC-MS)，测试成本高昂，测试速度较慢。但目前还没有采用酶法测定三聚氰胺或三聚氰酸的方法。因此，本发明人经过大量的研究工作，终于作出了本发明。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种三聚氰胺的测定方法，该方法灵敏度高、精确度好，线形范围宽广，专一性好，测试速度快速、测试成本低廉、稳定期长，适于广泛地推广应用。

本发明的目的是提供一种三聚氰胺检测试剂盒或试纸条。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明的三聚氰胺测定方法是一种将强酸水解、酶联法(CoupleReaction)与其他物理法、化学法、酶比色法(Enzymatic ColorimetricMethod)及酶循环扩增比色法(Enzymatic Recycling Method)组合而成的一种三聚氰胺或三聚氰酸(cyanuric acid)测定方法。

为了表述简便起见，除非另外特别地指出，在本文中提到三聚氰胺时，实际上它应该理解既是三聚氰胺，也是三聚氰酸。

本发明涉及三聚氰胺的测定方法，其特征在于该方法的步骤如下：

A、样品准备

三聚氰胺在强酸的作用下可以进行水解反应，其三聚氰胺中的胺基逐步地被羟基取代，生成相应的三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺，最后变成三聚氰酸。

因此，如果待测定物是三聚氰酸，则无需该处理步骤。

A-1)标准样品的制备

将1-3重量份三聚氰胺溶于3-9重量份含有10-40重量％无机强酸与10-40重量％硫酸氢钠的溶液中，然后，让该混合溶液在温度150-170℃下加热3-5小时，再将该溶液冷却到室温，然后进行离心分离得到上清液，往其中加入与所述无机强酸同等当量的无机强碱，中和在其溶液中存在的无机强酸，再将三聚氰胺浓度调整到200ppm，得到的溶液作为标准样品；

A-2)样品处理