[发明专利]抗牛成熟叠朊蛋白的单克隆抗体mab-bomDpl-9及其应用

权利要求书

1、抗中国黄牛成熟叠朊蛋白mDpl的单抗“mab-bomDpl-9”，其特征是轻链可变区基因为基因序列表<400>1，其重链可变区基因为基因序列表<400>2。

2、权利要求1所述的抗中国黄牛成熟叠朊蛋白mDpl的单抗“mab-bomDpl-9”制备方法，其特征是以纯化的大肠杆菌表达的重组牛mDpl为免疫原免疫小鼠，取免疫鼠的脾细胞与鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出杂交瘤细胞株，并克隆出阳性杂交瘤细胞株，在鼠体内接种杂交瘤细胞生产腹水抗体，收集腹水进行亲和层析纯化，得到单抗。

3、根据权利要求2所述的方法：其特征是采用含有中国黄牛mDpl编码基因的重组表达质粒pET30a(+)-bomDpl和含有该重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)plys表达菌株pET30a(+)-bomDpl-BL21(DE3)plys，以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达菌株，表达重组牛mDpl，收集包涵体后，采用亲和层析法和切胶后的电洗脱法纯化重组蛋白，以纯化后的重组牛mDpl为免疫原免疫Balb/C小鼠，取免疫鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，采用间接ELISA方法筛选融合的杂交瘤细胞株，再用有限稀释法克隆筛选的阳性杂交瘤细胞株，获得了能够稳定分泌抗重组牛mDpl的阳性杂交瘤细胞株----csbomDpl-9，在鼠体内接种杂交瘤细胞csbomDpl-9，生产腹水抗体，抽取腹水，离心收集上清液，以葡萄球菌蛋白A亲和纯化，得到抗牛mDpl的mab-bomDpl-9。

4、权利要求1所述的单抗用于制备供研究使用的试剂。

5、权利要求1所述的单抗用于制备相应的单链抗体。