[发明专利]猪胆膏或下脚料中鹅去氧胆酸的分离纯化制备方法

权利要求书

1.一种鹅去氧胆酸(3α，7α—二羟基—5β—胆甾烷酸，CDCA)的制备方法，其特征是，所用的原料为家禽及动物胆汁，胆膏或其提取胆红素，猪去氧胆酸之后的下脚料，包括以下步骤：(1)皂化.10％—15％NaOH，温度100—120℃。时间18—26小时；(2)氧化，工业双氧水0.5—2％，以达到类白色为准；(3)澄清，用1+1天然澄清剂0.5—5/万，温度80—100℃，PH9—14，0.5—2小时，板框压滤得澄清滤液；(4)用稀盐酸调PH2—3，得粗胆酸，用乙酸乙酯8倍溶解，活性碳1倍，回流2小时，将滤液浓缩到1/5结晶，得猪去氧胆酸。用乙酸乙酯重结晶得熔点198℃以上的猪去氧胆酸(HDCA)；(5)将二次猪去氧胆酸的乙酸乙酯回收完毕，剩下黑褐色的胆膏状物，加双氧水氧化，1+1天然澄清剂澄清，得澄清滤液；(6)一次钙盐；加入黑褐色的胆膏状物1倍量工业氯化钙(含量高效液相色谱检测为要求。克分子比鹅去氧胆酸：氯化钙＝1：1.1)温度60—80℃，时间2小时，板框压滤之后加入碳酸钠置换鹅去氧胆酸，加入克分子比为氯化钙的1.1温度90—100℃，时间1—3小时；(7)二次钙盐，以(6)的比列，工艺条件成钙盐后，用300—1000倍的去离子水洗涤，毕，调PH2.0—3.5得粗品鹅去氧胆酸；(8)粗品鹅去氧胆酸溶于碱水PH6.0—8.0上弱碱性或强碱性大孔树脂吸附饱和后，水洗除去杂质，稀碱液解析，以薄层层析来判断接收的起始点，终止点。调PH3真空干燥；(9)将鹅去氧胆酸溶于乙腈混合溶剂回流2小时，加入活性碳10％，热滤，结晶。重结晶得鹅去氧胆酸精品含量大于等于98％(HPLC)，含猪去氧胆酸<0.5％(HPLC)，石胆酸<0.1％，薄层层析(TLC)：一个鹅去氧胆酸主斑点，一个较轻微的猪去氧胆酸斑点。

2.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，在分离鹅去氧胆酸过程中，皂化12％NaOH，温度110℃，时间24小时；氧化双氧水用量1.5％，澄清剂用量5/万，温度100℃，PH10，时间1小时，结晶PH3，得到粗胆酸。用乙酸乙酯重结晶得到高熔点的猪去氧胆酸(198℃以上)。

3.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，在提取分离鹅去氧胆酸过程中，回收乙酸乙酯后的黑褐色膏状物，需进一步氧化，澄清，双氧水用量1.0％—3.0％，澄清剂用量0.5—5/万。

4.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，在提取分离鹅去氧胆酸过程中，一次钙盐氯化钙温度为65℃，时间2小时，加入量克分子比为1：1.1，以高效液相色谱检测计算，鹅去氧胆酸：氯化钙＝1：1.1.加入碳酸钠温度95℃，时间2小时，加入量克分子比为1：1.05，以加入氯化钙计算。

5.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，二次钙盐，同一次钙盐工艺，成钙盐后用500倍量去离子水水洗，至钙盐水溶液中无粗鹅去氧胆酸为止，调PH3.0。

6.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，鹅去氧胆酸溶解后，上弱碱性或强碱性大孔树脂吸附，鹅去氧胆酸母液PH为6.5。

7.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，鹅去氧胆酸中，用稀碱液解析时，用薄层层析来判断接收的起始点，终止点。

8.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，精制时，活性炭加入量为鹅去氧胆酸10％。回流2小时。

9.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，根据薄层层析的杂质斑点情况可有选择的选择溶剂来结晶，以去除杂质胆酸，使其鹅去氧胆酸大于等于98％(HPLC)猪去氧胆酸<0.5％(HPLC)，石胆酸<0.1％。

10.根据权利要求1叙述的制备方法，其特征是，在提取纯化鹅去氧胆酸过程中，原料可以是禽类胆汁胆膏，可以是动物类胆汁胆膏或是其提取胆红素或猪去氧胆酸之后的下脚料，前提是不变质，霉变。