[发明专利]无溶剂的提取方法

权利要求书

1.一种粗制微生物脂质，其包含高于15%的二十二碳六烯酸(DHA)和低于0.2ppm残留的非极性有机溶剂，其中所述脂质是通过包括下述步骤的方法自选自裂殖壶菌属、破囊壶菌属及其混合物的Thraustochytriales目微生物获得的：

(a) 裂解微生物细胞以产生裂解细胞混合物；

(b) 处理所述裂解细胞混合物以产生相分离的混合物，包含重层和轻层，其中所述重层包含水溶液，该水溶液包含固体细胞物质，且所述轻层包含乳化脂质，该乳化脂质包含所述脂质在水溶液中的悬浮液；

(c) 使所述重层与所述轻层分离；并

(d) 从所述轻层中获得所述脂质，

其中(a)包括加热所述细胞，使所述细胞处于碱性条件下，使细胞接触螯合化合物，或者它们的组合，

其中(b)包括离心所述裂解细胞混合物，和

其中所述方法中不使用非极性有机溶剂。

2.权利要求1的脂质，其中所述方法进一步包括：(e)将水性提取液加入到(c)的轻层中；和(f)重复(b)、(c)和(e)直至所述脂质在(d)前变成非乳化。

3.权利要求1或权利要求2的脂质，其中在发酵罐中在发酵培养基中培养所述微生物。

4.权利要求3的脂质，其中向所述发酵培养基加入碱。

5.权利要求4的脂质，其中所述碱选自氢氧化物，碳酸盐，碳酸氢盐，磷酸盐和它们的混合物。

6.权利要求1的脂质，其包含至少20%的二十二碳六烯酸。

7.权利要求1的脂质，其包含至少30%的二十二碳六烯酸。

8.权利要求1的脂质，其包含至少40%的二十二碳六烯酸。

9.权利要求1的脂质，其中(a)包括加热所述微生物到至少50℃的温度。

10.权利要求1的脂质，其中所述微生物能在低于12 g/L氯化钠的盐度水平生长。

11.权利要求1-2和4-10中任一项的脂质，其中所述脂质是自具有ATCC 20888、ATCC 20889、ATCC 20890、ATCC 20891或ATCC 20892或其混合物的鉴定特征的微生物获得的。

12.权利要求3的脂质，其中所述脂质是自具有ATCC 20888、ATCC 20889、ATCC 20890、ATCC 20891或ATCC 20892或其混合物的鉴定特征的微生物获得的。