[发明专利]一种氟乙酰胺类毒药的免疫层析检测试纸条及其制备方法无效
| 申请号： | 200810195528.3 | 申请日： | 2008-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN101403755A | 公开（公告）日： | 2009-04-08 |
| 发明（设计）人： | 胥传来;朱颖越;陈伟;彭池方;刘丽强;谢会玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | G01N33/558 | 分类号： | G01N33/558 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122江苏省无锡*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乙酰 毒药 免疫 层析 检测 试纸 及其 制备 方法 | ||
1、一种氟乙酰胺类毒药的免疫层析检测试纸条，其特征在于由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组成，PVC背衬上依次粘贴样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，金标垫上包被了抗氟乙酰胺类毒药的簇特异性抗体-胶体金标记物，硝酸纤维素膜上依次包被了氟乙酸钠-OVA和羊抗兔IgG。
2、一种权利要求1所述的氟乙酰胺类毒药的免疫层析检测试纸条的制备方法，其特征在于制备步骤为：
(1)制备氟乙酸钠-OVA偶联物：将氟乙酸钠与OVA以50∶1摩尔比溶于pH8、0.01mol/L的PBS缓冲溶液中、搅拌下加入碳二亚胺EDC交联剂，EDC摩尔用量为氟乙酸钠摩尔量的1/10，反应3h，4℃透析3天，形成氟乙酸钠-OVA偶联物；
(2)制备抗氟乙酸钠的多克隆抗体：用EDC法制备氟乙酸钠-BSA偶联物，用氟乙酸钠-BSA偶联物免疫得到抗氟乙酸钠的多克隆抗体；
(3)制备胶体金：用柠檬酸三钠还原剂将氯金酸还原制成20nm-40nm胶体金颗粒；
(4)制备抗氟乙酰胺类毒药的簇特异性抗体-胶体金标记物：将3mL胶体金调至pH 9，搅拌下逐滴加入蛋白浓度为0.075mg/mL的抗氟乙酸钠的多克隆抗体0.2mL，放置30min后加入牛血清蛋白BSA使终浓度为1％，放置至少30min后，10000转60min离心并用pH 9.0、0.002mol/L的硼酸盐缓冲液3mL重悬两次，最后用0.3mL重悬液重悬，得到稳定的抗氟乙酸钠抗体-胶体金标记物；
(5)将抗氟乙酸钠抗体-胶体金标记物包被在金标垫上，将氟乙酸钠-OVA偶联物和羊抗兔IgG分别包被在作为反应点的硝酸纤维素膜的测试线和质控线，在37℃烘箱充分干燥；
(6)试纸条的组装：将样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫由一端依次黏附在PVC背衬上，用切条机切割成3mm宽的细条，即得到用于检测的免疫层析检测试纸条。
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