[发明专利]一种肌苷的生产方法

权利要求书

1.一种肌苷的生产方法，步骤为：

A、一级种培养：将菌株放在一级培养基中培养，培养温度为30～32℃、旋转式摇床220±20rpm、培养时间10-15小时，得增值菌株；

B、二级种培养：将步骤A所得的增值菌株再放到二级培养基中，培养温度为35±0.5℃、培养时间8-12小时，得放大菌株；

C、菌株发酵：将步骤B所得的放大菌株放到发酵培养基中，进行发酵；

所述的一级种培养基是以下各浓度组份的混合物，各组分的浓度单位是g/L，淀粉双酶糖30±5、酵母粉26±6、KH₂PO₄4±2、硫酸铵10±2、硫酸镁1±0.5、CaCO₃10±2、尿素5±1、玉米浆60±10、酵母膏14±3、蛋白胨10±2、NaCL 1±0.4、腺嘌呤1.2±0.1、鸟嘌呤1.2±0.1，用去离子水配制后灭菌；

所述的二级种培养基是以下各浓度组份的混合物，各组分的浓度单位是g/L，淀粉双酶糖50±5、酵母粉26±6、KH₂PO₄4±2、硫酸铵10±2、硫酸镁1±0.5、CaCO₃10±2、尿素5±1、玉米浆60±10、酵母膏14±3、NaCL 1±0.4、腺嘌呤1.2±0.1、鸟嘌呤1.2±0.1、链霉素1.8±0.1，用去离子水配制后灭菌；

所述的发酵培养基是以下各浓度组份的混合物，浓度单位是g/L，淀粉双酶糖100±30、酵母粉14±5、KH₂PO₄5±1、硫酸镁2±1、脯氨酸2±1，味精0.5±0.1、玉米浆80±5、链霉素1.8±0.1、消泡剂，用去离子水配制后灭菌；

在发酵培养基中添加CaCL₂15g/L±3、脂肪酸1±0.1g/L以及乙酰辅酶A 0.04±0.02g/L。

2.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于：所述的尿素需在118±5℃的温度下单独消毒20min±5分钟。

3.根据权利要求2所述的生产方法，其特征在于：所述的一级种培养时，光密度的26倍OD*26净值≥0.04、无杂菌或噬菌体污染；所述的二级种培养时，通过碱性溶液控制二级培养基的pH值为6.7 ±0.2，光密度的26倍OD*26净值≥0.05，无杂菌或噬菌体污染。

4.根据权利要求3述的生产方法，其特征在于：所述的酵母粉先水解36±5小时，在发酵过程中通过流加糖份，维持糖浓度在2.2～2.5％。

5.根据权利要求4所述的生产方法，其特征在于：所述菌株发酵40±3小时后，加入5ug/ml溶菌酶，发酵55±5小时后，停止加入溶菌酶。

6.根据权利要求5所述的生产方法，其特征在于：所述的发酵初温37±0.5℃，发酵开始时的pH值是7.0，在发酵过程中通过碱性溶液调节pH值维持在6.0～7.0。