[发明专利]通过干扰巢蛋白表达来筛选抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡的药物的方法无效
申请号: | 200810199074.7 | 申请日: | 2008-10-13 |
公开(公告)号: | CN101726577A | 公开(公告)日: | 2010-06-09 |
发明(设计)人: | 项鹏;杨旭辉;夏添 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | G01N33/48 | 分类号: | G01N33/48;G01N33/53;C12Q1/02 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 刘宇峰 |
地址: | 510080 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 干扰 蛋白 表达 筛选 抑制 肿瘤 增殖 促进 细胞 药物 方法 | ||
1.一种通过干扰巢蛋白的表达来筛选抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡的药物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
A.提供肿瘤的特定细胞株和培养条件;
B.鉴定上述肿瘤细胞株表达巢蛋白的表达;
C.加入待筛选的药物;以及
D.培养48小时或更长的时间,检测巢蛋白的表达,检测结果与B步骤的结果进行比较,如果出现巢蛋白表达下调的情形,该待选药物成为抑制肿瘤增殖和/或促进细胞凋亡的先导药物。
2.根据权利要求1所述的通过干扰巢蛋白的表达来筛选抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡的药物的方法,其特征在于:所述步骤A中,所述的肿瘤细胞株是小鼠黑色素瘤B16细胞株或人黑色素瘤UACC903细胞株,所述培养基是通用的哺乳类动物细胞培养液,培养条件是5%CO2、37℃。
3.根据权利要求1所述的通过干扰巢蛋白的表达来筛选抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡的药物的方法,其特征在于:所述步骤B中,所述鉴定方法是用免疫荧光细胞化学和RT-PCR方法鉴定巢蛋白的表达。
4.根据权利要求1所述的通过干扰巢蛋白的表达来筛选抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡的药物的方法,其特征在于:所述步骤C中,所述待筛选的药物是SiRNA序列。
5.根据权利要求1所述的通过干扰巢蛋白的表达来筛选抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡的药物的方法,其特征在于:所述步骤D中,所述检测巢蛋白的表达的方法是免疫荧光细胞化学和RT-PCR检测方法。
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