[发明专利]反相高效液相色谱检测纺织品中蓝色素的方法

权利要求书

1.一种反相高效液相色谱检测纺织品中蓝色素的方法，其特征是，具有以下步骤：

1实验仪器与试剂

1.1实验仪器：

日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，Kromsil ODS-1C18，5μm，250mm×4.6mm 色谱柱；SPD-10A紫外检测仪，SCL-10A记录仪，KQ-500DE型数控超声波清洗器，电 热鼓风干燥箱，FINNIGAN LCQ DECA XP MAX液质联用仪；

1.2药品与试剂：

蓝色素标准样品：纯度为93％的C₃₉H₂₃ClCrN₇O₁₂S·2Na标准样品；

2样品制备

2.1提取样品制备：

将单一的染色纺织样品剪成3.5cm×3.5cm的小块状，称量重为0.5562g，将试样 置于50mL比色管内，加入15mL甲醇∶水＝80∶20的混合溶液，置于频率为450W超声 波浴中，在70±2℃下萃取30min，萃取液于室温冷却，用孔径为0.45μm的聚四氟乙 烯膜过滤器过滤，萃取物倒入1mL样品瓶中，旋紧特氟纶盖，保存备用；

2.2标准样品制备：

使用电子天平称量蓝色素标准样品5.4mg，用超纯水定容到10ml，得到浓度为 0.502mg/ml的标准溶液；分别取标准溶液4ml、3ml、2ml到10ml容量瓶中定容，分别 得到浓度为0.201mg/ml，0.151mg/ml，0.100mg/ml的溶液；分别取以上浓度的溶液4ml 到10ml容量瓶中定容，得到浓度分别为0.080mg/ml，0.060mg/ml，0.040mg/ml的溶液； 分别取浓度为0.201mg/ml和0.100mg/ml溶液1ml到10ml容量瓶中定容，得到浓度为 0.020mg/ml和0.010mg/ml的溶液；各取浓度为0.080mg/ml，0.060mg/ml和0.040mg/ml 溶液1ml置于10ml容量瓶中定容，得到浓度分别为0.008mg/ml，0.006mg/ml和 0.004mg/ml的溶液；

2.3流动相配备：

磷酸二氢钾与磷酸钾混合溶液：称取磷酸二氢钾2.60克和磷酸钾3.53克，用800 毫升纯水溶解，用10％的磷酸溶液调pH值到7.4，最后定容到1000毫升；

3测定方法

3.1色谱条件：

Kromsil ODS-1C18，5μm，250mm×4.6mm色谱柱；柱温：室温；检测波长：254nm； 流动相A：乙腈；流动相B：pH＝7.4的磷酸二氢钾与磷酸钾混合溶液；梯度洗脱：开始 使用A相∶B相＝20％∶80％，35min后使用A相∶B相＝80％∶20％；流速1.2mL/分钟；自 动进样，进样体积20μL；

3.2标准曲线：

分别量取2.2中制备的0.040mg/ml，0.020mg/ml，0.010mg/ml，0.008mg/ml， 0.006mg/ml和0.004mg/ml标准溶液各20μl注入液相色谱仪，按上述方法配置标准品溶 液用反相高效液相色谱法测定，在254nm波长处测定出峰面积，记录峰面积，以浓度为 横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线图；

得到回归方程为：

Y＝aX+b，其中a＝3.792316e-008，b＝2.967865e-003，R＝0.9995674；

3.3待测样品中蓝色素含量的测定：

取2.1制备的待测样品溶液，以3.1的色谱条件进行高效液相色谱测定，峰面积为 410406，采用上述标准曲线，计算出所得样品溶液中蓝色素的浓度为0.01824mg/ml。