[发明专利]一种从发酵液中提取灵芝多糖的方法

权利要求书

1.一种从发酵液中提取灵芝多糖的方法，其特征在于：所述方法是先对灵芝多糖发酵液进行预处理，除去菌体和蛋白质；通过超滤除去部分小分子杂质；再通过预处理好的阳离子交换树脂和阴离子交换树脂，除去杂质，灵芝多糖流过离子交换树脂得到分离；流出液经冷冻干燥后，再真空干燥，所述方法包括以下步骤：

(1)除菌体和不溶杂质：常温下，以10000～14000r/min高速离心，收集上清液I；

(2)除去蛋白质：取上清液I，用酸调pH至2～4，升温至45～55℃，保持30～45min，搅拌下用8～15℃水冷却；常温下，以10000～14000r/min高速离心，收集上清液II，再用碱调pH至7.5～8.5，升温至45℃～55℃，维持45～55min，搅拌下用8～15℃水冷却；常温下，以10000～14000r/min高速离心，收集上清液III，用酸调pH至5.5-6.5，常温下，以10000～14000r/min高速离心，收集上清液IV；

(3)超滤除去小分子杂质：取上清液IV经超滤膜超滤分离并浓缩，超滤膜的截留分子量为30000以上，浓缩液I备用；

(4)离子交换树脂的处理：离子交换树脂按常规方法处理后装柱；

(5)离子交换除去杂质：取浓缩液I上阳离子交换柱，先用灭菌水洗涤至洗脱液无色，再用灭菌生理盐水洗涤，收集洗脱液I；取洗脱液I上阴离子交换柱，先用灭菌水洗涤至洗脱液无色，再用灭菌生理盐水洗涤，收集洗脱液II；

(6)超滤除去小分子杂质：取洗脱液II经超滤膜超滤分离并浓缩，超滤膜的截留分子量为30000以上，浓缩液II备用；

(7)干燥：取浓缩液II冷冻干燥后，再经真空干燥，得白色粉末即为纯化的灵芝多糖。

2.如权利要求1所述的从发酵液中提取灵芝多糖的方法，其特征在于：步骤(2)中所述酸为盐酸，碱为氢氧化钠、碳酸钠、氨水中的任何一种。

3.如权利要求1所述的从发酵液中提取灵芝多糖的方法，其特征在于：步骤(3)中所述超滤膜为中空纤维超滤膜。

4.如权利要求1所述的从发酵液中提取灵芝多糖的方法，其特征在于：步骤(3)中所述浓缩液I体积为步骤(2)中所述上清液IV体积的20％。

5.如权利要求1所述的从发酵液中提取灵芝多糖的方法，其特征在于：步骤(6)中所述浓缩液II体积为步骤(5)中所述洗脱液II体积的20％。