[发明专利]固体5’-磷酸二酯酶及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 200810201058.7 申请日: 2008-10-10
公开(公告)号: CN101429502A 公开(公告)日: 2009-05-13
发明(设计)人: 邱蔚然;曹静;谢胜;闫蓬勃;邱志云 申请(专利权)人: 南通秋之友生物科技有限公司
主分类号: C12N9/22 分类号: C12N9/22;C12P19/30
代理公司: 上海金盛协力知识产权代理有限公司 代理人: 罗大忱
地址: 226236江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 固体 磷酸二酯酶 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.固体5’-磷酸二酯酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)液体酶浓缩液的提取;

(2)在步骤(1)提取的液体酶浓缩液中加入沉淀剂,收集糊状5’-磷酸二酯酶沉淀物;

所述沉淀剂选用硫酸铵或有机溶剂,所述有机溶剂为乙醇;

当沉淀剂选用硫酸铵时,其用量为在所述浓缩液达到40-80%饱和度;沉淀时,在浓缩液加入硫酸铵,达到40%饱和度,待其完全溶解后放置1-4小时,离心或过滤除去沉淀,然后再加入硫酸铵搅拌溶解,使硫酸铵的饱和度为80%,然后放置2-8小时,离心或过滤可得到糊状沉淀物;

当沉淀剂选用乙醇时,乙醇的重量用量为浓缩液的3~5倍;

(3)然后将沉淀物对重量浓度0~1%的甘油水溶液透析,将透析液干燥,即可获得5’-磷酸二酯酶粉末;

所述干燥为喷雾干燥,进风温度为120~140℃,出风温度为70~90℃,酶液预热温度为40-60℃。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将沉淀物在4~20℃对重量浓度0~1%的甘油水溶液透析10~48小时。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,液体酶浓缩液的提取方法如下:

将麦芽根与水或缓冲液混合,然后10~70℃浸泡1~24小时,过滤收集浸泡液,浸泡液在2500-3500转/分钟下离心分离,收集离心液,然后离心液超滤浓缩,使体积为原体积的1/2-1/3,获得浓缩液,为液体酶;

水或缓冲液的重量为麦芽根的8~12倍;

所述缓冲液的pH为4-10。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,麦芽根为啤酒工业废弃的麦芽根。

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