[发明专利]一种高灵敏度检测肺炎支原体的靶序列及试剂盒

权利要求书

1.一种检测肺炎支原体的遗传标记物，其特征在于，它具有SEQ ID NO：1中连续的280bp高度保守重复核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的遗传标记物，其特征在于，它具有SEQ ID NO：2中连续的123个核苷酸序列。

3.一种检测肺炎支原体的试剂盒，其特征在于，它含有特异性扩增肺炎支原体遗传标记物的引物对，所述的引物序列一条与SEQ ID NO：1所示的序列相同，且另一个引物序列与SEQ ID NO：1所示的序列互补，其引物对为：

上游引物SEQ ID NO：3为：5’-TTC TCC ACC GGG TTC AAC CT-3’

下游引物SEQ ID NO：4为5’-AGG CGC GGT TAT ATC ATC CA-3’

或者包含有上述序列的向5’端或/和3’端延长的序列；

或者与上述序列同源性大于85％的序列；

或者上述序列的碱基互补序列；

或者使用上述所有序列中的任意一种或一种以上的组合。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还含有探针，所述探针的核苷酸与SEQ ID NO：1所示的序列相同或互补，其检测探针为：

检测探针SEQ ID NO：5为：5’-MAR CTG GAT TGG GAA TGG GTA CAGGT-MAR-3’；

或者包含有上述序列的向5’端或/和3’端延长的序列；

或者与上述序列同源性大于85％的序列；

或者上述序列的碱基互补序列；

或者使用上述所有序列中的任意一种或一种以上的组合。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括DNA提取液、荧光PCR反应液、定量参考品、阳性对照品和阴性对照品。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所说的参考品为如下DNA序列SEQ ID NO：6为：

5’-TTCTCCACCG GGTTCAACCT TGTGGGGTCG GTGCTCGACCAGGTGTTGGA TTATGTGCCC TGGATTGGGA ATGGGTACAGGTATGGCAAT AACCACCGGG GCGTGGATGA TTATAACCGCGCCT-3’。

7.一种检测样品中肺炎支原体的方法，其特征在于，它包括操作步骤：

①样品DNA提取；

②将提取的DNA作为模板，用特异性扩增肺炎支原体遗传标记物的引物对(SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4)进行PCR扩增。

③检测扩增产物是否存在，存在扩增产物表示样品吕存在肺炎原体。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的检测方法是通过检测荧光信号的强弱来检测样品中肺炎支原体。