[发明专利]特氏丙酸杆菌细菌素抗菌代谢物的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种特氏丙酸杆菌细菌素抗菌代谢物的制备方法，包括下列步骤：

a.培养特征

特氏丙酸杆菌菌株(Propionibacterium.thoenii)保藏于美国模式典型物收集中心(ATCC)，保藏编号ATCC4874，该菌培养于SLB固体培养基中，形成小而突起菌落.呈奶油色、黄色、橙色或深红色，培养温度30～37℃；

b.特氏丙酸杆菌的活化

安瓿管开封后，用无菌吸管，吸取0.3～0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使特氏丙酸杆菌菌体溶解呈悬浮状，取0.1～0.2ml菌体悬浮液，注入SLB液体培养基内，然后30℃静止深层培养48h，培养物即可用做发酵种子；

c.特氏丙酸杆菌的发酵

接种量2～8％(v/v)，发酵温度29.5℃～30.5℃，发酵的碳源由葡萄糖、乳糖、蔗糖、果糖或麦芽糖中的任何一种或一种以上组成，碳源用量为培养基的2～4％(w/v)，氮源由胰蛋白胨、酵母粉、玉米浆、酵母提取物、乳酸钠中的任何一种或一种以上组成，氮源用量为培养基的2～3％(w/v)，无机盐由K₂HPO₄、KH₂PO₄、MnSO₄中的任何一种或一种以上组成，无机盐用量为培养基的0.05～0.30％(w/v)，琼脂用量为培养基的0.5～3％(w/v)，其余为水，密闭厌氧发酵4～6天，即可得到所述特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢物。

2.权利要求1所述特氏丙酸杆菌细菌素抗菌代谢物的制备方法，其特征是：步骤c得到的含有所述特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢物的发酵液进一步旋转蒸发或超滤，使体积浓缩到原来的1/3～1/6，然后在冷冻干燥机上进行冷冻干燥，预冻温度为-45℃，干燥温度设为-20℃，干燥12-24h直到水分完全升华为止，得到所述特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢物的干粉，4℃密封保存。

3.权利要求1或2制备的特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢物在食品防腐保鲜，消毒剂，抗感染药物，动植物病害防治和医药领域中用于抑制革兰氏阴性菌，霉菌和酵母菌的应用。