[发明专利]特氏丙酸杆菌细菌素抗菌代谢物的制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及特氏丙酸杆菌菌株产生的含有细菌素的天然抗菌代谢物的制备方法，以及上述特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢物在食品防腐保鲜，消毒剂，抗感染药物，动植物病害防治和医药等方面的用途。

背景技术

目前最常见的食品防腐剂是苯甲酸，苯甲酸钠，山梨酸，山梨酸钾等化学防腐剂。但是化学防腐剂潜在的安全隐患愈来愈不容忽视，而生物防腐剂具有抑菌物质多，来源广泛，安全无毒、性能稳定等优点，作为新型的天然防腐剂在食品保存中具有巨大的应用潜力，已日益受到人们的关注。

细菌素是细菌通过核糖体合成机制生成的一大类蛋白或多肽类物质，最初发现于细菌之间的拮抗作用中。随着乳链菌肽(Nisin)作为第一个应用到食品的细菌素，人们对微生物代谢产生的细菌素的研究越来越深入，而细菌素在食品保藏，食品发酵和医药卫生等方面已显示出了重要意义。某些乳酸菌细菌素能抑制食品中常见的腐败菌和一些病原菌。乳酸菌细菌素具有相对稳定的化学性质和强的抑菌活性，可广泛应用于食品天然防腐剂的开发。细菌素作为一种蛋白、多肽类物质，抑菌活性强，对热、酸等稳定性好，可被酶作用而降解，不会在人体内残留，具有较高的安全性，在食品中的应用范围广。丙酸杆菌广泛存在于乳制品、土壤、青贮饲料中。特氏丙酸杆菌是多形态、无芽孢形成、杆状的革兰氏阳性菌，它来自奶制品、无致病性，已经应用在丙酸和乙酸的工业发酵中。目前市场上存在的细菌素作为食品防腐剂的产品主要有以下两种：一、由乳酸菌产生的Nisin，也是目前研究最清楚的细菌素。乳球菌素Nisin介导的细胞溶菌是通过改变细胞表面自由能，进而使细胞通透性发生改变最终导致细胞裂解。Nisin对革兰氏阳性菌有抑菌作用，包括病原菌如李斯特菌单核细胞，也可以抑制杆菌、梭菌的过量生长。Nisin与金属螯合剂EDTA、酒石酸、磷酸盐结合可抑制更多的细菌如G-大肠杆菌0154.117。做为商品Nisin已在欧洲上市几年，用于保存多种食品包括乳制品、奶酪、罐装蔬菜和儿童食品。1988年被美国食品及药品管理局(FDA)批准可用于巴氏灭菌的奶酪和已加工的奶酪，防止梭菌孢子的大量繁殖和梭菌毒素的过量产生。二、是由Lactobaccilluus rhamnosus LC 705和P.freudenreichii JS发酵得到的Bioprofit，据报道它可以抑制乳产品中的酵母菌和酸性面包中的芽孢杆菌，这种抑制效果是由于这两种菌之间的协同作用。

目前，特氏丙酸杆菌(Propionibacterium.thoenii)保藏于美国模式典型物收集中心(ATCC)，保藏编号ATCC 4874。特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢产物的制备方法及其应用尚未见诸报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种特氏丙酸杆菌(Propionibacterium.thoenii)ATCC 4874细菌素抗菌代谢物组合物的制备方法，以及这种特氏丙酸杆菌细菌素的抗菌代谢产物在食品防腐保鲜，消毒剂，抗感染药物，动植物病害防治和医药等方面的应用。

本发明技术方案，一种特氏丙酸杆菌细菌素抗菌代谢物的制备方法，包括下列步骤：

a.培养特征

特氏丙酸杆菌菌株(Propionibacterium.thoenii)保藏于美国模式典型物收集中心(ATCC)，保藏编号ATCC 4874，该菌培养于SLB固体培养基中，形成小而突起菌落.呈奶油色、黄色、橙色或深红色，培养温度30～37℃；

b.特氏丙酸杆菌的活化

安瓿管开封后，用无菌吸管，吸取0.3～0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使特氏丙酸杆菌菌体溶解呈悬浮状，取0.1～0.2ml菌体悬浮液，注入SLB液体培养基内，然后30℃静止深层培养48h，培养物即可用做发酵种子；

c.特氏丙酸杆菌的发酵