[发明专利]一种安全的冻干哺乳动物源凝血酶制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及凝血酶，尤其涉及一种安全的冻干哺乳动物源凝血酶制剂及其制 备方法。

背景技术

现有蛋白制品的病毒灭活/去除方法有其局限性，如S/D法(有机溶剂/表面活 性剂法)只对包膜病毒有效，因而导致蛋白制品的应用仍有一定的风险。湿热法(60 ℃，10小时)、干热法(80℃，72小时或者100℃，30分钟)能够有效地杀灭人 类无脂包膜病毒，如B19病毒和甲肝病毒。但是，对于动物源的病毒，如牛细小 病毒、猪细小病毒以圆环病毒，由于其为无脂包膜病毒，S/D不能有效地将其杀灭， 同时，由于这类病毒对热的抵抗，常用的湿热和干热法对其基本无效。而在国内外 批准的众多医用生物材料中，动物来源的产品所占比例不小。

因此寻找一种能灭活所有病毒，且对蛋白制品活性影响较小、操作方便的方 法，将有助于提高蛋白制品应用的安全性。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种成本低廉、性 能稳定、耐辐照的安全的冻干哺乳动物源凝血酶制剂及其制备方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种安全的冻干哺乳动物源凝血酶制剂，其特征在于，该凝血酶制剂包括凝 血酶、稳定剂，所述的凝血酶制剂承受20-40KGy的钴⁶⁰伽玛射线的辐照，在保证 有效地杀灭可能污染的病原微生物的同时，维持凝血酶的功能和结构。

所述的凝血酶为蛋白质，所述的稳定剂包括L-精氨酸盐酸盐、氯化钠和枸橼 酸三钠；

所述的蛋白质、L-精氨酸盐酸盐、氯化钠、枸橼酸三钠的含量如下(g/100ml)：

蛋白质                        0.1-10；

L-精氨酸盐酸盐                0.1-10；

氯化钠                        0.01-10；

枸橼酸三钠                    0.01-5。

所述的蛋白质、L-精氨酸盐酸盐、氯化钠、枸橼酸三钠的含量优选如下 (g/100ml)：

蛋白质                        0.5-5；

L-精氨酸盐酸盐                0.1-2；

氯化钠                        0.3-1；

枸橼酸三钠                    1-3。

所述的凝血酶制剂还包括残留水分，该残留水分的含量为0.5-15％。

所述的残留水分的含量优选0.5-5％。

所述的凝血酶包括哺乳动物来源的凝血酶。

所述的哺乳动物包括牛、马、猪、羊。

所述的凝血酶制剂为冻干粉。

一种安全的冻干哺乳动物源凝血酶制剂的制备方法，其特征在于，该方法包 括采用无菌技术获取哺乳动物全血，在洁净度100级的生产场地内进行血浆的分 离，凝血酶粗提，纯化；测定纯化后凝血酶的蛋白质含量，计算蛋白质重量，加入 稳定剂，搅拌混匀；冻干，封装；进行钴⁶⁰伽玛射线辐照，得到安全的冻干哺乳 动物源凝血酶制剂。

所述的哺乳动物全血为经过严格屠宰前和屠宰后检疫的定点养殖场生产的哺 乳动物全血；所述的稳定剂包括L-精氨酸盐酸盐、氯化钠和枸橼酸三钠；所述的 伽玛射线辐照的剂量为20-40KGy，温度为-10-40℃。

γ射线灭活病原体的机理如下：