[发明专利]人可溶性鸟苷酸环化酶的高效制备方法

权利要求书

1.人可溶性鸟苷酸环化酶的高效制备方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

⑴将人可溶性鸟苷酸环化酶sGC-β1基因克隆至表达载体MBPHT-mCherry2，转 化大肠杆菌菌株Rosetta（DE3）pLys S；

⑵将⑴所得菌株接种于改进后的TB培养液，所述的TB培养液含有5-10g/L蛋 白胨，5-10g/L酵母提取物，2-10ml/L甘油，0.01-0.02mol/L KH₂PO₄，0.1-0.2  mol/L K₂HPO₄，1-2g/L MgSO₄，1-4g/L NaNO₃，10-30mM葡萄糖；加IPTG 诱导表达过夜；

⑶将⑵所得菌体破菌，离心，过Ni-NTA柱，tev酶酶切，过Ni-NTA柱，heme 重组，即得人sGC-β1heme全蛋白。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，⑶中破菌方法是超声、反复冻融或者 溶菌酶酶解。