[发明专利]一种可用于制备长循环脂质体的巯基化聚乙二醇的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学合成领域，具体涉及一种巯基化聚乙二醇衍生物的合成方 法。

背景技术

脂质体是一种磷脂双分子层构成的递药载体，具有很多优点，但是进入血 液循环后，容易被网状内皮系统吞噬，半衰期很短，而在脂质体膜表面引入聚 合物分子后可形成空间稳定的脂质体。研究最为广泛的聚合物是聚乙二醇。本 发明研制的巯基化聚乙二醇可以与马来酰亚胺化的磷脂反应生成聚乙二醇化 的磷脂，从而制备出具有长循环作用的脂质体；还可以与含有巯基的蛋白反应 生成聚乙二醇化的蛋白，从而使该蛋白不易被网状内皮系统吞噬。

巯基化聚乙二醇的合成方法已有文献报道：Suzuki等(Biochimica et Biophysica Acta.1245(1995)9-16)将聚乙二醇单甲醚在40℃与琥珀酸酐反应 生成聚乙二醇-琥珀酸酯(II)，再与N-羟基琥珀酰亚胺在脱水剂存在的条件下 反应，生成聚乙二醇-琥珀酰亚胺酯(III)，再通过与胱氨酸反应生成聚乙二醇- 胱氨酸(IV)，经二硫苏糖醇(DTT)断键，通过葡聚糖凝胶柱分离得到产品(I)。 按文献方法在合成(II)时使用氯仿作为溶剂，40℃反应4h，结果仍有大量原料 未反应；在制备(III)的过程中，按文献的方法难以进行，得不到相应的中间体； 按文献的方法合成(IV)后，不经分离纯化就直接断(IV)的二硫键，通过葡聚糖 凝胶分离，难以得到高纯度的巯基化聚乙二醇；并且文献缺乏对巯基化聚乙二 醇衍生物的可靠鉴定方法。

因此，本领域迫切需要提供一种如式I所示的巯基化聚乙二醇的制备方法， 所述的方法不仅可以有效进行，而且可以得到纯度高的式I化合物。

n＝3-125；优选n＝30-60。

发明内容

本发明旨在提供一种式I化合物的新的制备方法。

本发明中，提供了一种如式I所示的化合物的制备方法，所述的方法包括 步骤：

(1)将聚乙二醇单甲醚和琥珀酸酐混合于氯仿中，在60-90℃条件下反 应得到如式II所示的化合物；

(2)将式II化合物、N-羟基琥珀酰亚胺、脱水剂和有机碱混合，得到如 式III所示的化合物；所述的脱水剂选自1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二 亚胺盐酸盐、N，N-二异丙基碳二亚胺、或N，N-二环己基碳二亚胺；所说的有机 碱选自N-甲基吗啉、三乙胺、吡啶、或二甲氨基吡啶；

(3)将式III化合物和半胱氨酸混合，得到如式IV所示的化合物；和

(4)将式IV化合物和二硫苏糖醇混合，得到如式I所示的化合物。

在另一优选例中，聚乙二醇单甲醚和琥珀酸酐的摩尔比为1∶1-8。

在另一优选例中，步骤(1)的反应在吡啶存在下进行。

在另一优选例中，步骤(2)中式II化合物、N-羟基琥珀酰亚胺、脱水剂 和有机碱的摩尔比为1∶1∶1∶3-1∶6∶2∶6。

在另一优选例中，步骤(2)中脱水剂为1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳 酰二亚胺盐酸盐；有机碱为N-甲基吗啉。

在另一优选例中，步骤(3)的反应在pH7.4的缓冲液中进行。

在另一优选例中，步骤(3)中将式III化合物和半胱氨酸在pH7.4的缓冲 液中混合，然后进行硅胶层析分离得到如式IV所示的化合物。

在另一优选例中，硅胶层析流动相为二氯甲烷∶甲醇＝7-12∶1。

在另一优选例中，步骤(4)中式IV化合物和二硫苏糖醇的摩尔比为1∶1 -3.5。

在另一优选例中，将式IV化合物和二硫苏糖醇混合于pH8.6的缓冲液中。

据此，本发明提供了一种如式I所示的巯基化聚乙二醇的制备方法，所述 的方法不仅可以有效进行，而且可以得到纯度高的式I化合物。

附图说明

图1显示了本发明提供的式I化合物的制备方法流程图。

图2中的1显示了实施例1得到的式I化合物的薄层层析结果；而其中的 2和3都是当在第三步时，没有经过硅胶层析步骤，而通过第四步得到的化合 物I的薄层层析结果。

具体实施方式

发明人经过研究，发现了一种新的式I化合物的制备方法，所述的方法包 括步骤如图1所示：