[发明专利]一种用于生产咪唑立宾的发酵培养基

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域；尤其涉及一种发酵培养基及其制备方法和用 途。

背景技术

咪唑立宾(mizoribine，MZR)是1971年从霉菌Eupenicillium brefeldianum的培养液中分离而得的一种咪唑类核苷，后在放射菌 (Actinomycetes)科的Streptomyces属Streptomyces brefeldianum的发酵 产物中中也有MZR，其化学名为5-羟基-1-β-D-呋喃糖基-1H-咪唑-4-羧酰胺。 MZR对核酸代谢中的嘌呤合成具有抑制作用。MZR进入机体内，由于细胞内、 外的浓度差而向细胞内移动。作为一种前药，进人细胞后，它在腺苷激酶的作 用下磷酸化，形成活性物质MZR-5’-单磷酸化物(MZR-5’-P)，它可以竞争性 地抑制IMP脱氢酶和GMP合成酶，使细胞内的GMP减少，核酸的合成减少，从 而进一步抑制细胞的增殖。抗菌谱为白色念珠菌，对细菌和其他真菌作用不明 显。

EP1029927A1公布了利用霉菌Eupenicillium brefeldianum(US.3888843) 发酵生产咪唑立宾的过程：从斜面培养基上取一环咪唑立宾产生菌接种于含种 子培养基(葡萄糖1.0％，酪蛋白水解物0.2％，大豆蛋白胨0.5％，121℃灭菌 20min，上述百分比均为重量百分比)的500ml摇瓶中，装量100ml，26℃振荡 培养24小时后接种于含发酵培养基(蔗糖6.0％、大豆蛋白胨2.0％、 (NH₄)₂SO₄0.5％、NaNO₃1.0％、KH₂PO₄0.2％、MgSO₄·7H₂O0.02％，上述百分比均为重 量百分比)的发酵罐中，通风条件下，26-28℃培养96小时，经HPLC检测效 价为750-800mg/ml。该发明公开了一种Eupenicillium brefeldianum菌产生 的化合物MZR及其制备方法，但是使用该方法生产MZR，菌体生长过快，发酵 后期供养不足，发酵培养产物产率低下。

因此，本领域迫切需要提供一种使发酵产物咪唑立宾产率高的发酵培养 基。

发明内容

本发明旨在提供一种发酵培养基。

本发明的另一个目的是提供上述发酵培养基的制备方法。

本发明的再一个目的是提供上述发酵培养基的用途。

在本发明的第一方面，提供了一种用于生产咪唑立宾的发酵培养基，以培养基 的总重量计，所述的培养基含有1.0-5.0w/w％有机氮源、2.0-8.0w/w％碳源、0.2 -1.5w/w％天然油脂、和0.5-3.0w/w％无机盐；

所述的有机氮源选自蛋白胨(鱼粉)、大豆蛋白胨、棉籽粉、黄豆饼、豆粕、 花生粕、或粉玉米浆干粉；

所述的碳源选自麦芽糊精、蔗糖、乳糖、玉米淀粉、糊精、葡萄糖、或玉米 粉；

所述的天然油脂选自豆油、玉米油、葵花籽油、卵磷脂、或鱼油；

所述的无机盐的酸根离子选自下述的一种或多种：硝酸根、磷酸根、硫酸根、 碳酸根；

所述的无机盐的金属离子选自下述的一种或多种：钠、钾、鎂、钙。

在另一优选例中，所述的有机氮源选自蛋白胨(鱼粉)、大豆蛋白胨、或粉 玉米浆干粉；优选蛋白胨(鱼粉)。

在另一优选例中，所述的碳源选自糊精或葡萄糖；所述的天然油脂选自玉米 油。

在另一优选例中，所述有机氮源的含量为1.0-3.0w/w％；更佳地，为2.0w/w％。

在另一优选例中，所述碳源的含量为4.0w/w％；所述天然油脂的含量为 0.5w/w％。

在另一优选例中，以培养基的总重量计，所述的培养基含有：

1.0-5.0w/w％有机氮源，所述有机氮源选自蛋白胨(鱼粉)、大豆蛋白胨、 或粉玉米浆干粉；更佳地，含有2.0w/w％有机氮源；

2.0-8.0w/w％碳源，所述碳源选自糊精或葡萄糖；更佳地，含有4.0w/w％碳源；

0.2-1.5w/w％玉米油；更佳地，含有0.5w/w％玉米油；和