[发明专利]一种载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡试剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡试剂及其制备方法。

背景技术

10-羟基喜树碱是所有的天然喜树碱同类物或合成喜树碱同类物中活性最大的一个天然衍生物，HCPT主要对增殖细胞敏感，是细胞周期特异性药物。作用于S期，并对G2及M期边界具有延缓作用，对G0期无效。HCPT的抗癌机理主要通过抑制拓朴异构酶I(TOPO I)，干扰肿瘤细胞的DNA复制，抑制肿瘤细胞生长，它与其它常用抗癌药物无交叉耐药。由于它具有高效、广谱、低毒的特点，使大剂量化疗成为可能。此药的毒副反应较大，呈剂量依赖型毒性，主要表现为：骨髓抑制，引起白细胞减少、胃肠道反应、泌尿道刺激等，由于半衰期较短，临床常需延长给药时间，或延长疗程，骨髓抑制和消化道毒性也随之增加，这些毒副反应一定程度上限制了羟喜树碱的临床应用。此外，羟喜树碱E环上的α-羟基内酯环是活性的必需基团，但羟喜树碱为水不溶、脂难溶药物，一般用其钠盐水溶液作为临床制剂，但形成钠盐后会使其E环上的α-羟基内酯环打开，打开后形成的药物羧酸盐形式表现出极低的抗拓扑异构酶I活性。有研究表明，内酯环结构破坏后，其药理活性下降90％。因此，解决羟喜树碱溶解度差、半衰期短、内酯基团不稳定等问题是当前的研究热点。

超声微泡是一种内含气体的微球，用于增强组织超声显像，以提高疾病诊断率。近年来，超声微泡还被尝试用于运载药物进行靶向治疗。以超声微泡携载药物，静脉注射入体内后，在体外可采用诊断超声对微泡到达器官、组织进行监控，同时可运用一定能量的治疗超声进行体外定点辐照可使微泡破裂，将药物在局部释放出来-即超声破坏载药微泡定位释放治疗技术。在此过程中，可对药物进行实时、靶向、定位控释。除此之外，超声破坏微泡瞬间产生的空化效应，在局部产生微声流、射流、休克波等，可提高组织毛细血管膜和细胞膜的通透性，有利于增强肿瘤细胞对药物的吸收，提高药物对肿瘤细胞的杀伤效果。

发明内容

本发明提供一种载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡试剂及其制备方法。

本发明所述的一种载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡试剂，其特征是，由类脂双分子层薄膜包裹生物惰性气体构成，10-羟基喜树碱包封于双分子层中，类脂双分子层薄膜以下重量份配比的原料制得：10-羟基喜树碱2～3份，磷脂混合物7～9份，非离子表面活性剂0.1～0.5份。

所述载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡优选粒径范围为0.5～6μm，更优选粒径范围为1.3～2.8μm。为保证微泡应用的安全性和获得良好的超声靶向控释效果，更优选的微泡平均粒径为1.6μm左右。

为了提高微泡稳定性，所述的磷脂混合物包括以下重量份配比的A和B：5～7份A和1.5～2份B，其中A为1，2-二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱和双肉豆蔻磷脂酰胆碱中的一种，B为1，2-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇5000-1，2-二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇2000-1，2-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、1，2-二棕榈酰磷脂酰乙醇胺中的一种。磷脂-聚乙二醇5000-1，2-二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(MPEG5000-DPPE)和聚乙二醇2000-1，2-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)具有长循环功能。

为了进一步提高微泡稳定性，所述的磷脂混合物还包括0.5～1份C，其中C为负电荷磷脂1，2-二棕榈酰磷脂酸和1，2-二棕榈酰磷脂酸中的一种。

为延长微泡在血液循环中的滞留时间及获得较好的超声生物学作用，所采用的生物惰性气体为全氟丙烷。

为了提高微泡的产量并可调节微泡的粒径，所述的非离子表面活性剂选用婆洛沙姆或者吐温80。

本发明所提供的载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡试剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将质量份配比10-羟基喜树碱2～3份、磷脂混合物7～9份、非离子表面活性剂0.1～0.5份与400～600份溶液D混合，加热15～30分钟，使其分散形成药物、磷脂混悬液；

(2)将上述脂质混悬液经灭菌处理后分配至容量为1.5ml的管形瓶中；以全氟丙烷气体置换管形瓶上方空气后进行密封，每支管形瓶上方气体体积为0.5～1ml；

(3)将管形瓶转移至机械振荡仪振荡，制得载10-羟基喜树碱脂质超声微泡悬浮液，所得的悬浮液即为所述的载10-羟基喜树碱的脂质超声微泡试剂；

步骤(1)中所说的溶液D为磷酸盐缓冲液与非水溶剂的混合液、生理盐水与非水溶剂的混合液、糖类与非水溶剂的混合液或醇类与非水溶剂的混合液。磷酸盐缓冲液、生理盐水、糖类或醇类溶液与非水溶剂的体积比为9～10∶1，糖类和醇类溶液为等渗或高渗。