[发明专利]一种改构的人淀粉样多肽突变体－普兰林肽(pramlintide)的制备方法在审
| 申请号： | 200810218533.1 | 申请日： | 2008-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN101413009A | 公开（公告）日： | 2009-04-22 |
| 发明（设计）人： | 黄亚东;吴道贫;胡宏伟;苏志坚;刘洁生;曲红艳;李江峰;柯实 | 申请（专利权）人： | 广东暨大基因药物工程研究中心有限公司;广州暨南大学医药生物技术研究开发中心 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00;C07K14/575 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510630广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 淀粉 多肽 突变体 普兰 pramlintide 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种改构的人淀粉样多肽突变体-普兰林肽(pramlintide)的制备方法，该方法包括以下步骤：
(1)提供编码小分子泛素相关修饰因子成熟肽、普兰林肽融合蛋白的核苷酸序列如SEQ IDNO：2所示，该融合基因的5’末端带有6个组氨酸的编码序列，
(2)将步骤(1)中核苷酸序列连接到合适原核表达载体pET-3c中，
(3)用步骤(2)的重组表达载体转化适当的大肠杆菌宿主细胞，
(4)在适于以可溶形式表达融合蛋白的条件下培养步骤(3)中被转化的大肠杆菌宿主细胞，
(5)大肠杆菌宿主细胞内分别表达出小分子泛素相关修饰因子成熟肽和普兰林肽的融合蛋白，编码该融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示，
(6)收集发酵细胞并破碎细胞，得到纯化的普兰林肽。
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