[发明专利]广东虫草菌丝体的生产方法有效
申请号: | 200810220624.9 | 申请日: | 2008-12-30 |
公开(公告)号: | CN101463326A | 公开(公告)日: | 2009-06-24 |
发明(设计)人: | 宋斌;林群英;李泰辉;黄浩;沈亚恒;李挺 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 广州科粤专利代理有限责任公司 | 代理人: | 潘伟健 |
地址: | 510070广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 广东 虫草 菌丝体 生产 方法 | ||
1.一种广东虫草菌丝体的生产方法,其特征包括以下的步骤:
(1)将日本虫草广东变型(Cordyceps japonica f.guangdongensisT.H.Li,Q.Y.Lin et B.Song)GDIM_C050423 CCTCC No.M206051接种到PDA培养基上,18~26℃下进行暗培养,使菌落直径长至4~6cm,得到斜面菌种;
(2)将步骤(1)得到斜面菌种接种至一级液体培养基,每100mL接入5~15块斜面菌种,20~28℃下振荡培养,至菌丝球充满全部培养基,得到一级液体菌种,所述的一级液体培养基pH6.0~6.5,每1000mL培养基中含有葡萄糖10~15g,蛋白胨3~10g,麦芽提取粉3~6g,酵母浸膏3~6g,其余为水;
(3)将步骤(2)得到的一级液体菌种再次接种到二级液体培养基进行培养,直至菌丝球充满全部培养基,得到二级液体菌种,所述的二级液体培养基配方同步骤(2)所述一级液体培养基;
(4)将步骤(3)得到的二级液体菌种接种到生产用的液体培养基发酵培养或将二级液体菌种用无菌水稀释后接种到大米培养基中避光培养,至菌丝球或菌丝充满全部液体培养基或大米培养基,过滤或离心收集充满菌丝的菌球干燥或粉碎,或收集充满菌丝的大米培养基直接烘干,即得到广东虫草菌丝体,所述的生产用的液体培养基pH4~9,每1000mL培养基中含有麦芽提取粉10~30g,葡萄糖10~20g,黄豆5~15g,酵母浸膏1~4g,其余为水,所述的大米培养基由大米和营养液按质量比1∶1~1.5配制而成,所述营养液按总质量分数100%计,配方为:葡萄糖1.0%~1.5%,蛋白胨0.3%~1.0%,麦芽提取粉0.3%~0.6%,酵母浸膏0.3%~0.6%,其余为水,pH5.0~7.0。
2.根据权利要求1所述的一种广东虫草菌丝体的生产方法,其特征是步骤(1)所述的暗培养时间是20~30天,步骤(2)所述的振荡的摇床转速是120~180r/min,培养时间是7~8天,步骤(3)所述的一级液体菌种在培养基中的体积分数是3%~15%,所述的培养时间是4~7天,步骤(4)所述的二级液体菌种在生产用的液体培养基或大米培养基中的体积分数是3%~15%,所述的发酵培养的搅拌速度是150~180r/min,通气量是8~25L/min,所述的生产用的液体培养基的培养时间是2~5天,所述的大米培养基的避光培养时间是9~20天。
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