[发明专利]一种测定奶粉中肽含量的方法

权利要求书

1.一种测定奶粉中肽含量的方法，包括以下步骤：

1)将奶粉溶解于水，在酸性条件下采用加热沉淀法和重金属盐溶液沉淀法沉淀其中的大分子蛋白质，离心去除沉淀；

2)取上清液进行双缩脲反应，然后在540nm检测溶液的吸光度值；

3)配制一系列肽标准浓度溶液，同样进行双缩脲反应，然后在540nm检测溶液的吸光度值，制作肽浓度-吸光度值的标准曲线；

4)根据吸光度值与肽浓度成正比的规律，通过标准曲线获得步骤2)得到的吸光度值对应的肽浓度，从而计算出奶粉中的肽含量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)将奶粉溶解于水，用酸调节pH值至4.0-4.8后先进行加热沉淀，然后冷却至室温，离心去除沉淀，上清液进一步用重金属盐溶液进行沉淀，再次离心去除沉淀。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)中所述酸选自盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、三氯乙酸和磺基水杨酸中的一种或多种。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)加热沉淀的温度为80-120℃，加热时间为10-30min。

5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1)中所述重金属盐选自乙酸铅、硫酸铅、氯化铅、乙酸铜、硫酸铜、氯化铜、乙酸汞、硫酸汞或氯化汞中的一种或多种。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中重金属盐溶液沉淀所用重金属盐的浓度为0.1-100g/L。

7.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)离心的转速大于或等于2000r/min，时间5-20min。

8.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤3)以含有2-10个氨基酸残基的任意一种肽配制肽标准浓度溶液。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述步骤3)以酸性水溶液为溶剂配制肽浓度为1-5g/L的溶液，其中所述酸性水溶液所含酸的种类及其pH值与步骤1)相同，然后用同样的溶剂进行梯度稀释，获得一系列浓度的肽标准溶液，分别进行双缩脲反应。

10.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)将质量为m的奶粉溶解于水后用酸调节溶液pH值为4.0-4.8，加热至80-120℃沉淀10-30min，离心后将所有上清液用重金属盐溶液沉淀，静置后离心，去除沉淀后的所有上清液再用pH值为4.0-4.8的酸性水溶液定容至体积V，摇匀后取样进行步骤2)，在步骤2)和步骤3)进行双缩脲反应的实验条件完全相同的情况下，步骤4)其中C为从标准曲线查到的步骤2)测得的吸光度值对应的肽浓度。