[发明专利]一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法

权利要求书

1.一种萃取和常压柱层析法纯化微囊藻毒素MCLR的方法，其特征在于，所述 方法包括以下步骤：

1)破碎藻细胞；

2)向破碎的藻细胞中加入甲醇，使甲醇的终浓度为40～100％，进行藻毒素的振 荡提取，收集提取后的上清液，蒸发去除甲醇；

3)对步骤2)得到的溶液进行液液萃取，抽取水相，得到MCLR水溶液；

4)对步骤3)得到的MCLR水溶液进行C18固相萃取，用0～20％的甲醇洗脱杂 质，最后用50～100％甲醇洗脱MCLR，将得到的MCLR洗脱液蒸发至干，并用100％ 甲醇溶解，得到MCLR甲醇溶液；

5)将步骤4)得到的MCLR甲醇溶液上样至Sephadex LH-20凝胶层析柱，以 100％甲醇为流动相，进行层析分离，收集MCLR活性峰，浓缩蒸干后溶于超纯水中， 得到MCLR水溶液；以及

6)将步骤5)得到的MCLR水溶液上样至DEAE离子交换层析柱，用3mmol/L NaCl溶液洗脱，收集MCLR活性峰，制得MCLR纯品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，向破碎的藻细胞中 加入甲醇，使甲醇的终浓度为80％。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤3)中，使用正己烷、二氯 甲烷或三氯甲烷进行液液萃取。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤3)中，使用正己烷进行液 液萃取。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤3)中，萃取比例为：水相∶ 有机相＝2∶1。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤4)中依次使用0％、5％、 20％的甲醇洗脱杂质。