[发明专利]林蛙抗癌肽及其制备方法

权利要求书

1.一种林蛙抗癌肽，其特征在于以林蛙皮肤为原料于pH3-5酸化乙醇中浸提，将提取液离心后得上清液，上清液冻干浓缩，溶于蒸馏水中配制成溶液，经凝胶柱层析，1-3M醋酸为洗脱液，280nm检测波长下，分离得到分子量为1-10kD具有抗癌活性的肽，冻干浓缩为白色粉末，其在pH 3-10范围内具有活性，pH值为5时活性最强，于0～10℃保存24个月仍有活性。

2.一种制备林蛙抗癌肽方法，其步骤如下：

(1)将林蛙皮加入2-10倍体积的酸化乙醇，于4-20℃浸提24-72小时，其中酸化乙醇为0.5-5M盐酸与乙醇调至pH值4-5或0.5-5M醋酸与乙醇调至pH值3-4为宜；

(2)提取液在3000-8000rpm下离心10-60分钟，收集上清液；

(3)对沉淀物重复2-3次步骤1，2；

(4)合并上清液，冻干浓缩；

(5)冻干粉溶于蒸馏水中配成溶液；

(6)上述溶液经Sephadex G-50凝胶柱层析，4-10℃条件下层析分离，凝胶柱以1-3M醋酸平衡，上样，1-3M醋酸洗脱，流速为0.1-0.6ml/min，收集洗脱液，每8min收集一管，根据检测器测得的280nm下的紫外吸收峰合并各组分，收集分子量为1-10kD的活性组分，凝胶柱还可以为Sephadex G-25或Sephadex G-75；

(7)活性组分透析脱盐，冻干浓缩，于-20℃保存，得到林蛙抗癌肽。

3.权利要求1所述的林蛙抗癌肽在制备抗癌药物或保健食品中的应用。