[发明专利]一种防治作物真菌病害的大环内脂类组合物及其制备工艺

权利要求书

1.一种农用杀菌剂，其特征在于它是以阿扎霉素F3、阿扎霉素F4和尼菲霉素

组合物为有效成分的杀菌剂WYLZ-1349，阿扎霉素F3、阿扎霉素F4和尼菲霉素的分子式分别为C₅₆H₉₅N₃O₁₇、C₅₇H₉₇N₃O₁₇和C₅₉H₁₀₃N₃O₁₈，分子量分别为1082.36、1096.39和1142.46，分别具有如下的平面结构：

              

R = H, 阿扎霉素F3                           尼菲霉素

R = CH₃, 阿扎霉素F4

产生WYLZ-1349所用的菌株是马来西亚链霉菌（Streptomyces malaysiensis） ECO 00002，保藏编号为CGMCC No. 1680。

2.一种制备如权利要求1所述农用杀菌剂的方法，步骤包括：

（1）种子培养过程：

采用马来西亚链霉菌（Streptomyces malaysiensis） ECO 00002，在种子罐中加入下列成分，按重量百分含量计：酵母膏0.4~0.8，葡萄糖0.4~1.0，麦芽膏1.0~2.0，复合维生素0.001~0.002，微量盐0.005~0.01，以及0.05~1.0 %（V/V）有机硅消泡剂，其余含量为水，121℃高压灭菌40分钟后备用；

培养条件：在种子罐中培养36~48小时，培养温度为26~32℃，pH 6.5~7.0，通气量1:(0.5~0.8)（V/V），罐压0.03~0.05 Mpa，搅拌速率100~150转/分钟；

（2）抗生素发酵过程：

在发酵罐内加入下列成分，按重量百分含量计：甘露醇2.0~3.0，大豆粉2.0~4.0，磷酸氢二钾0.01%以及0.05~1.0 %（V/V）有机硅消泡剂，其余含量为水；在上述物料放入发酵罐后，灭菌前调整pH值为7.5，121℃高压灭菌40分钟备用；将步骤（1）培养好的种子液接入发酵罐，上罐接种量为10%~20%（V/V）；

培养条件：培养时间72~96小时，培养温度为26~32℃，pH 6.5~7.0，通气量1:(0.5~1.0)（V/V），罐压0.03~0.05 Mpa，搅拌速率100-200转/分钟；

（3）发酵产物后处理，按以下步骤依次进行：

A. 将发酵液进行过滤，过滤得上清液和菌丝体；B. 将菌丝体放入提取罐中，加入丙酮或甲醇有机溶剂搅拌破壁6~10小时后，过滤得菌丝体的提取液；C. 将菌丝体的提取液抽入到浓缩罐中，在700 mmHg真空度，蒸气压0.02 MPa，温度20~30℃条件下减压浓缩回收丙酮；待丙酮回收完后，将菌丝体的提取清液与步骤A.所得的上清液一起采用大孔吸附树脂吸附，用丙酮或甲醇有机溶剂洗脱，含活性组分的洗脱液经浓缩后得到WYLZ-1349的粗提物；D. 在粗提物中加入适当比例的各种农药通用载体或助剂后得成品WYLZ-1349；

（4）WYLZ-1349中活性成分的精制与鉴定：取步骤（3）中步骤C.得到的部分粗提物经过硅胶及Sephadex LH-20凝胶柱层析，可得到半精制品，然后运用高效液相色谱制备分别得到3个主要活性成分即阿扎霉素F3、阿扎霉素F4和尼菲霉素的纯品，纯度可达98-99%。

3.一种如权利要求1所述的农用杀菌剂的应用，其特征在于所述杀菌剂应用于防治下列作物真菌病害：水稻稻瘟病、烟草赤星病、番茄灰霉病和辣椒炭疽病。