[发明专利]发酵液中新霉素含量的快速测定方法及装置

权利要求书

1.一种发酵液中新霉素含量的快速测定方法，其特征在于：包括以下步骤:

(1).待测溶液的制备：取发酵液,用常规的离心沉降法将发酵液中的固形物除去, 得到上清液,将上清液用孔径为0.2~10微米的微孔滤膜过滤,制得供分离溶液；

(2).离子交换分离：取1~6BV的供分离溶液，BV为倍离子交换树脂体积，用蠕动泵控制2~40BV/h的流速上离子交换柱吸附，供分离溶液上完后随即用1~3BV的水顶洗，BV/h为倍离子交换树脂体积/小时；随后用1~4mol/L的氨水解吸离子交换柱中的新霉素并随即用有刻度的容器收集解吸液，收集的解吸液体积为所取供分离溶液体积的2~6倍，充分混合均匀后作为供测定溶液；

(3).旋光度法测定:将上述所得供测定溶液用1分米长的旋光管按常规的旋光度测定法测定其旋光度,按下式计算发酵液中新霉素的含量:C₁(mg/ml)＝K₁V₂α/V₁

式中C₁为每ml发酵液中的新霉素重量，重量单位为mg；

K₁为特性系数，主要与新霉素的性质有关，取值为12.3~12.9；

准确数值可用抗生素微生物检定法进行对比测定求得；

α为测得的旋光度；

V₁为所取供分离溶液的体积，单位为ml；

V₂为供测定溶液的体积，单位为ml；

若用发酵单位表示发酵液中新霉素的含量，则按下式计算:C₂(μg/ml)＝K₂V₂α/V₁

式中C₂为每ml发酵液中的新霉素单位(μg)；

K₂为特性系数，主要与新霉素的性质有关，取值为12300~12900；

准确数值可用抗生素微生物检定法进行对比测定求得；

α为测得的旋光度；

V₁为所取供分离溶液的体积，单位为ml；

V₂为供测定溶液的体积，单位为ml。

2.根据权利要求1所述的一种发酵液中新霉素含量的快速测定方法，其特征在于：离子交换柱的处理:在步骤(2)中解吸完毕后的离子交换柱用3~6BV的水将柱中的氨水洗尽后即可重复使用；同一根离子交换柱累计使用10次以上后，需用3~6BV的2mol/L氢氧化钠溶液以1~2BV/h的流速处理，用3~6BV的水洗后再用3~6BV的2mol/L氨水将离子交换树脂转为铵型，最后用3~6BV的水将柱中的氨水洗尽后即可投入下一轮使用。

3.根据权利要求1所述的发酵液中新霉素含量的快速测定方法，其特征在于：步骤(2) 所述的供分离溶液的用量是2~4BV；离子交换分离的流速8~20BV/h；水顶洗的用量是1.5~2BV；所述的氨水的浓度是2mol/L。

4.根据权利要求1所述的发酵液中新霉素含量的快速测定方法，其特征在于：步骤(2) 所述的收集解吸液的体积是供分离溶液体积的2~4倍。

5.根据权利要求1所述的发酵液中新霉素含量的快速测定方法，其特征在于：步骤(3) 所述的特性系数的取值范围是K₁＝12.4~12.6，K₂＝12400~12600。