[发明专利]迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂中的应用

说明书

技术领域：

本发明涉及迷迭香酸在大肠杆菌L-天冬酰胺酶激活剂方面的应用，属于生物医药领域。

背景技术：

L-天冬酰胺酶(L-Asparaginase；EC3.5.1.1)又名L-门冬酰胺酶或L-天门冬酰胺酶，商品名为左旋门冬酰胺酶，是一种有抗癌活性的酶蛋白，广泛见于动物的组织、细菌、植物和部分啮齿类动物的血清中，在大肠杆菌中为胞内酶，但在人体的各种组织器官中的分布未见报道，最初是从豚鼠血清中提取的。L-天门冬酰胺酶活性形式为一同源四聚体，每一亚基由330个氨基酸组成，能专一催化L-天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨。

1953年，Kidd发现豚鼠血清有抗癌作用，1961年Broom证实豚鼠血清中的抗肿瘤因子是L-天冬酰胺酶。自20世纪70年代以来，人们利用大肠杆菌和欧文菌等制备L-天冬酰胺酶，不仅应用于儿童急性淋巴细胞白血病的治疗，也应用于祖金森病、淋巴肉瘤、黑素肉瘤和胰腺癌等疾病的治疗，取得了较好的疗效。近年来的研究表明，此酶是一种重要的抗肿瘤药物，因而越来越受到人们的重视。

临床上L-天冬酰胺酶广泛应用于儿童急性淋巴细胞白血病的治疗(childhood acute lymphoblastic leukemia，ALL)。L-天冬酰胺酶单独使用时，对ALL的有效率为60％，与长春碱(vincristine)及皮质甾类药物(corticosteroids)联合使用时，对ALL的有效率高达95％。另外，L-天冬酰胺酶对单细胞白血病、淋巴肉瘤、白血病性网状内皮组织增多症以及慢性髓细胞白血病也有一定的疗效，对胰腺癌细胞的增多还有一定的抑制作用，是临床治疗某些肿瘤的重要药物(韦玉军等，2005)。与普通化疗抗癌药相比，L-天冬酰胺酶既可抑制癌细胞增殖，又不伤害正常细胞，有效地实现了酶的特异抗癌作用。

L-天冬酰胺酶在机体内可催化天冬酰胺的水解，其抗肿瘤的作用机制在于它能够降低病变部位L-天冬酰胺和L-谷氨酰胺的浓度，这两种氨基酸是合成嘌呤环和嘧啶环的重要组成部分。肿瘤细胞缺乏天冬酰胺合成酶，不能合成L-天冬酰胺，需要摄取外源L-天冬酰胺才能存活。而正常细胞自身能合成L-天冬酰胺，当外源L-天冬酰胺被分解掉时，癌细胞合成核苷酸和蛋白质的能力就会显著降低，因此L-天冬酰胺酶能有效抑制肿瘤细胞的增殖。

L-天冬酰胺酶常来源于大肠杆菌，作为人体的异源蛋白，临床使用常常引起一些副作用，从轻度的过敏反应如发热、恶心、呕吐、腹泻等到危险的过敏性休克和血栓栓塞、胰腺炎等，这与细菌蛋白引起的免疫反应有关，这种不良反应限制了L-天冬酰胺酶在治疗方面的应用。减弱免疫反应则有利于L-天冬酰胺酶作为治疗癌症药物的应用，而降低其用量是一种有效的手段。微量迷迭香酸能显著激活L-天冬酰胺酶，可以降低临床上L-天冬酰胺酶的用量，从而减弱人体对该药物免疫反应。

迷迭香酸(Rosmarinic acid，简称RosA)是一种天然的酚酸化合物，最早于1958年由Ellis在迷迭香中分离提取，因而得名。RosA广泛存在于唇形花科和紫草科植物中。RosA的药理功能丰富，有抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗凋亡、抗凝集、抗过敏、抗抑郁、抗辐射的作用。目前已有多种从植物中提取迷迭香酸的技术报道，杜桂彩等在其专利(ZL 200410075747.X)中介绍了一种从紫苏中生产迷迭香酸的生产工艺；吕晓玲等也在申请的专利说明书(申请号：200610015599.1)中公开了一种从含迷迭香酸的植物中提取迷迭香酸的方法；热娜·卡斯木等在其申请的专利(申请号：200510056151.X)中介绍了一种从新疆鼠尾草中提取迷迭香酸的方法及其在防治糖尿病并发症方面的应用。1990年德国Nattermann公司已将迷迭香酸作为解热、镇痛、抗炎药投放市场，说明该化合物人体使用的安全性。

基于迷迭香酸对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的激活作用，临床上有望通过二者的联合应用，降低L-天冬酰胺酶的用量，减轻其副作用；同时由于L-天冬酰胺酶是细菌氮素代谢的关键酶，利用迷迭香酸或其衍生物激活胞内L-天冬酰胺酶，导致氮素代谢紊乱，达到抗菌的目的。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种大肠杆菌L-天冬酰胺酶的激活剂；通过迷迭香酸与L-天冬酰胺酶的联合用药可降低临床上肿瘤治疗过程中的L-天冬酰胺酶的用量，降低因其免疫原性带来的副作用，或者据此设计针对细菌L-天冬酰胺酶的靶位点的迷迭香酸衍生物作为新的抗菌药物。