[发明专利]一种重组鸡α-干扰素的注射液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种重组鸡α-干扰素的注射液及其制备方法，属于禽畜药物生产技术领域。

背景技术

干扰素(Interferon，IFN)是脊椎动物免疫系统的重要细胞因子之一，它在机体抵多种病原微生物、抗肿瘤以及免疫调节中起重要作用。鸡的干扰素无论是天然的还是重组干扰素均具有较强的抗病毒的能力。其中鸡α-干扰素抗流感病毒和水疱性口炎病毒的能力最强，对新城疫病毒，传染性支气管炎病毒，马立克病毒等都有较强的抑制效果。

公开号为CN1594568的中国专利申请，公开了一种重组鸡α-干扰素的生产方法及其重组载体属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。它将鸡α-干扰素的基因序列通过电转化方式整合到酵母上的特定位置。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，表达外源蛋白的纯度高于70％，经过65636倍稀释发现能完全抑制100-1000TCID₅₀的水疱性口炎病毒的攻击。鸡α干扰素对VSV和禽流感病毒的转录、翻译阶段抑制能力尤其明显，对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒等也都有较强的抑制作用，而且还有强大抗肿瘤、抗增殖作用，对鸡的马立克氏病毒也具有较强的抑制作用。虽然该专利文件较好的解决了重组鸡α干扰素的制备问题，但在具体重组鸡α-干扰素的使用上，并未找到合适的用量，当使用过量时，会造成机体免疫系统紊乱，当使用不足时，达不到很好的预防和治疗效果，以至于疾病的重新爆发，并且该专利无法进行正常的大规模生产和应用，只能是实验室产品，具有产品局限性和应用规模局限性。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种重组鸡α-干扰素的注射液及其制备方法。

一种重组鸡α-干扰素的注射液，其特征在于，组分如下，均为重量百分比：

黄芪多糖1％-5％，苯甲酸0.1‰-0.5‰，鸡α-干扰素原液5％-20％，白蛋白0.1％-0.5％，余量为注射用水。注射用水为溶剂，单支干扰素制品体积为10ml。

所述的重组鸡α-干扰素注射液的pH＝5.0-6.0。

所述的白蛋白为鸡血白蛋白或牛血白蛋白。

所述的鸡α-干扰素原液可为参照公开号为CN1594568的中国专利申请公开的制备方法进行制备获得的产品。

一种上述重组鸡α-干扰素注射液的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)将黄芪多糖、苯甲酸、白蛋白混匀，然后溶于注射用水并高压灭菌处理，得注射溶剂；

(2)将步骤(1)中制得的注射溶剂与鸡α-干扰素原液混合并补加剩余注射用水，得注射液原液；

(3)将步骤(2)制得的注射液原液调节pH至5.0-6.0，得重组鸡α-干扰素的注射液。

(4)将步骤(3)制得得重组鸡α-干扰素的注射液在无菌条件下分装成瓶。

所述的高压灭菌处理可采用湿热高压蒸汽灭菌法灭菌。

所述步骤(3)中调节pH采用100mM磷酸盐缓冲溶液调节。

所述步骤(4)中分装后每瓶注射液的活力为2500～8000万活力单位。活力单位(U)是指以能抑制50％细胞病变的干扰素最大稀释度定义为一个活性单位。

使用方法：

预防病症：注射每次1-5万活力单位/羽，每天1次，2-3天

治疗普通病症：注射每次2-8万活力单位/羽，每天1次，连续2-5天

治疗重症：注射每次4-12万活力单位/羽，每天1次，连续3-5天

本发明的有益效果如下：

本发明针对鸡新城疫、传染性支气管炎病有显著疗效，经实验证明，对鸡新城疫、传染性支气管炎病治愈率达70％-90％，高于以往的相关同类禽药，并且由于采用生物试剂，可有效避免化学合成药品对患禽肉质的污染，提高禽类食用品质。

本产品使用时能够节约养殖过程药物成本10％-35％，并且本产品对鸡轮状病毒引起的腹泻和肠炎亦有很好的疗效，同时能降低雏鸡阶段因免疫抑制引起抵抗力下降而导致的死亡率。

附图说明

图1：鸡α-干扰素酵母表达载体构建示意图；

图2：鸡α-干扰素成熟蛋白基因PCR产物电泳分析

1、DNA分子量标准，从上至下依次为2000bp，750bp，500bp，100bp；

2、阴性对照；

3、PCR产物，箭头为530bp；

图3：PCIZa-A-chIFNα阳性克隆载体的酶切鉴定

1、DNA分子量标准，从上至下依次为2000bp，1000bp，500bp，250bp；

2、3是ECOR I和Sal I酶切的重组表达载体。箭头为530bp的条带；