[发明专利]一种抗体标记信号放大方法有效
申请号: | 200810243473.9 | 申请日: | 2008-12-19 |
公开(公告)号: | CN101441221A | 公开(公告)日: | 2009-05-27 |
发明(设计)人: | 吴堂明;潘能科;陆冬雷 | 申请(专利权)人: | 江苏三联生物工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 任 益 |
地址: | 214101江苏省无锡市新区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗体 标记 信号 放大 方法 | ||
1、一种抗体标记信号放大方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)、称取低熔点琼脂糖0.1g,溶于10ml纯化水,45~50℃水浴溶解后,加入新配0.1M NaIO45~10ml,50~60℃水浴反应45~120分钟后,加入9~15ml无水乙醇,沉淀析出后,8000~12000rpm离心5~20分钟,去除上清溶液后加入10ml纯化水清洗沉淀,重复操作2次,清洗结束后,加入50ml纯化水45~50℃水浴溶解沉淀,制成溶液A;
(2)、量取待标记抗体5mg,用NaOH调pH至8.6~9.6,加入100~500ul溶液A,搅拌均匀后,37℃反应30~60分钟,制成溶液B;
(3)、称取5mg辣根过氧化物酶溶解于1ml蒸馏水中,完全溶解后,加入100~200ul新配的0.1MNaIO4溶液,30~37℃避光反应10~30分钟后,加入新配10%乙二醇10~20ul,30~37℃避光反应8~15分钟后,制成溶液C;
(4)、将溶液B与溶液C按体积比1∶1~1∶3混合,30~37℃避光反应25~45分钟后,加入等体积的醛基封闭液30~37℃反应15-30分钟,然后将混合后溶液装入透析袋中,用1mM PH8.0的磷酸缓冲液避光透析12~24小时,透析结束后将混合后溶液从透析袋中取出。
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