[发明专利]表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢的制备方法

权利要求书

1. 一种表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢的制备方法，其特征在于，利用枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白基因cotB、cotC或cotG为分子载体，与枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipA重组后，构建融合表达的整合性重组质粒，并转化枯草芽孢杆菌得到重组菌株，诱导重组菌株产生芽孢表面展示脂肪酶的重组芽孢。

2.如权利要求1所述的表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢的制备方法，其特征在于，所述的融合表达的整合性重组质粒是将所述的枯草芽孢衣壳蛋白基因与脂肪酶基因lipA重组构建的质粒，在这些重组质粒中含有整合基因amyE片段、适用于大肠杆菌或枯草芽孢杆菌的抗性选择标记基因、芽孢衣壳蛋白基因的启动子和不含终止密码子的编码序列与脂肪酶基因lipA的编码序列重组后的DNA片段。

3.如权利要求2所述的表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢的制备方法，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌重组菌株是整合性重组质粒转化枯草芽孢杆菌的所得菌株，该菌株染色体上含有适用于枯草芽孢杆菌的抗性选择标记基因、以及芽孢衣壳蛋白基因的启动子和不含终止密码子的编码序列与脂肪酶基因lipA的编码序列，这些基因插入淀粉酶基因中并导致淀粉酶失活。

4.如权利要求3所述的的表面展示具有催化活性的脂肪酶的重组芽孢的制备方法，其特征在于，重组芽孢是枯草芽孢杆菌重组菌株诱导形成的枯草芽孢杆菌芽孢，其表面展示脂肪酶，该重组芽孢具有三酰甘油脂水解和转酯催化功能。