[发明专利]透皮免疫流感多价疫苗的制备及其方法

权利要求书

1.一种透皮免疫流感多价疫苗，其特征在于该透皮免疫流感多价疫苗 包含透皮免疫佐剂、流感多价疫苗抗原和促渗剂；流感多价疫苗包含了流感 三价或四价；流感多价疫苗是灭活疫苗或减毒活疫苗；灭活疫苗抗原含量为 1.5μg-100μg/0.2ml/人份，减毒活疫苗抗原的量为5×10⁶ETD₅₀-50× 10⁶EID₅₀/0.2ml/人份或0.1×10^6.5-7.5TCID₅₀-10×10^6.5-7.5TCID₅₀/0.2ml/人份；

促渗剂为二甲基亚砜、油酸、咪喹莫特、乙醇、丙酮以及吡咯酮衍生物 或葵基甲基亚砜；抗原与促渗剂的混合体积比例为10∶1；透皮免疫佐剂为细 菌ADP-外毒素的成员，包括霍乱毒素、大肠杆菌不耐热毒素以及它们的突变 体，此外还包括CpG等其他类型佐剂；透皮免疫佐剂与抗原的混合重量比例 为1∶2、1∶9、1∶5或1∶7。

2.如权利要求1所述的透皮免疫流感多价疫苗，其特征在于该透皮免疫 流感多价疫苗中其中灭活疫苗是灭活全病毒疫苗、裂解疫苗、病毒体或病毒 样颗粒中的任何一种。

3.如权利要求1所述的透皮免疫流感多价疫苗，其特征在于该透皮免 疫流感多价疫苗采用液体、粉末、乳脂或乳化或贴片的透皮剂型。

4.如权利要求2所述的透皮免疫流感多价疫苗，其特征在于该透皮免 疫流感多价疫苗采用液体、粉末、乳脂或乳化或贴片的透皮剂型。

5.如权利要求1、2、3或4所述的透皮免疫流感多价疫苗的制备方法， 其特征在于该方法为：通过反向遗传学方法，A、B型多价疫苗抗原分别以 冷适应减毒流感病毒株A/Ann Arbor/6/60和B/Ann Arbor/1/66为拯救病毒 骨架，整合流行病毒株的表面抗原基因，利用流感病毒质粒拯救系统制备多 价疫苗抗原，通过感染鸡胚、Vero细胞、MDCK细胞或二倍体细胞进行培养， 然后除菌、超滤浓缩、蔗糖密度梯度离心或其他层析方法分离纯化；浓缩纯 化后的多价疫苗抗原与透皮免疫佐剂、促渗剂混合制成疫苗贴剂。

6.如权利要求5所述的透皮免疫流感多价疫苗的制备方法，其特征在 于该方法中的透皮免疫佐剂是LT、CT或CpG；促渗剂是油酸或咪喹莫特。