[发明专利]靶向FAK和EGFR的 RNA干扰质粒-脂质体抗肿瘤复合物无效
申请号: | 200810300784.4 | 申请日: | 2008-03-28 |
公开(公告)号: | CN101280317A | 公开(公告)日: | 2008-10-08 |
发明(设计)人: | 魏于全;邓洪新;陈俐娟 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/11;A61K9/127;A61K47/24;A61K48/00;A61P35/00 |
代理公司: | 成都虹桥专利事务所 | 代理人: | 武森涛 |
地址: | 610021四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 靶向 fak egfr rna 干扰 质粒 脂质体 肿瘤 复合物 | ||
1. 一种RNA干扰表达载体,其特征在于:它能在体内表达SEQ IDNO.1所示的FAK基因RNA干扰序列和SEQ ID NO.2所示的EGFR基因RNA干扰序列。
2. 根据权利要求1所述的RNA干扰表达载体,其特征在于:所述的表达载体为质粒。
3. 根据权利要求2所述的RNA干扰表达载体,其特征在于:所述质粒的骨架为pGensil-2。
4. 根据权利要求1所述的RNA干扰表达载体,其特征在于:其表达SEQID NO.1所示的FAK基因RNA干扰序列的表达框架序列为SEQ ID NO.7所示;其表达SEQ IDNO.2所示的EGFR基因RNA干扰序列的表达框架序列为SEQ ID NO.8所示。
5. 根据权利要求4所述的RNA干扰表达载体,其特征在于:具有SEQID NO.9所示的序列。
6. 权利要求1~5任一项所述的RNA干扰表达载体的脂质体复合物。
7. 根据权利要求6所述的脂质体复合物,其特征在于:所述的脂质体为阳离子脂质体。
8. 根据权利要求7所述的脂质体复合物,其特征在于:所述的阳离子脂质体由摩尔比为1∶1的DOTAP和胆固醇组成。
9. 权利要求1~5任一项所述的RNA干扰表达载体或权利要求6~8任一项所述的脂质体复合物在制备抗肿瘤药物组合物或抗肿瘤辅助药物组合物中的用途。
10. 一种抗肿瘤药物组合物或抗肿瘤辅助药物组合物,是由权利要求1~5任一项所述的RNA干扰表达载体或权利要求6~8任一项所述的脂质体复合物作为主要活性成分添加药学上可以接受的辅料制备而成。
11. 根据权利要求10所述的抗肿瘤药物组合物或抗肿瘤辅助药物组合物,其特征在于:还含有肿瘤化疗药物作为活性成分。
12. 根据权利要求10任一项所述的抗肿瘤药物组合物,其特征在于:所述肿瘤化疗药物为顺铂。
13. 一种制备权利要求1~5任一项所述的RNA干扰表达载体的方法,其特征在于包括以下步骤:
a、分别设计并合成能表达SEQ ID NO.1所示的FAK基因的RNA干扰序列的表达框架序列和SEQ ID NO.2所示的EGFR基因的RNA干扰序列的表达框架序列;
b、将a步骤所得表达框架序列转入目标表达载体,使表达框架序列能由启动子操作表达,扩增筛选即得。
14. 一种制备权利要求8所述脂质体复合物的方法,其特征在于包括以下步骤:
a、将DOTAP与胆固醇Chol按1∶1的摩尔比进行混合,制成DOTAP/Chol阳离子脂质体混悬液;
b、将RNA干扰表达载体包裹到DOTAP/Chol阳离子脂质体中形成表达载体阳离子脂质体复合物,将该复合物稀释在葡萄糖溶液中,并调整使得葡萄糖浓度最终为5%并混合均匀,即得。
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