[发明专利]具有改变特性的布丘氏菌属菌植酸酶变体

权利要求书

1.分离的植酸酶变体，其具有植酸酶活性，且由SEQ ID NO：3所示 的氨基酸序列组成。

2.DNA，其编码权利要求1的植酸酶。

3.表达载体，其包含权利要求2的DNA。

4.宿主细胞，其是用权利要求3的表达载体转化的。

5.根据权利要求1的植酸酶变体，其具有与SEQ ID NO：2的植酸酶 相比较而言增加的热稳定性。

6.酶组合物，其包含权利要求1的植酸酶。

7.权利要求6的酶组合物，其中所述组合物是动物饲料组合物。

8.权利要求6的酶组合物，其中所述组合物用于淀粉液化工艺。

9.权利要求6的酶组合物，其中所述组合物用于醇发酵工艺。

10.权利要求6的酶组合物，其进一步包含选自以下的酶：葡糖淀粉 酶、α-淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、和它们的组合。

11.发酵培养基，其包含产生自丝状真菌细胞培养物的权利要求1的 植酸酶。

12.权利要求11的发酵培养基，其中丝状真菌细胞是木霉属 (Trichoderma)细胞。

13.权利要求12的发酵培养基，其中木霉属细胞是里氏木霉(T.reesei)。

14.在宿主细胞中产生植酸酶的方法，包括：

a)用DNA构建体转化宿主细胞，其中所述DNA构建体包括在宿主 细胞中具有转录活性的启动子和与其有效连接的编码权利要求1的植酸酶 变体并具有植酸酶活性的异源多核苷酸，

b)在合适的培养基中培养经转化的宿主细胞，以允许表达所述植酸酶， 和

c)产生植酸酶。

15.根据权利要求14的方法，其中所述宿主细胞是真菌细胞、细菌细 胞或植物细胞。

16.根据权利要求15的方法，其中所述真菌细胞是酵母细胞或丝状真 菌细胞。

17.根据权利要求14的方法，其进一步包括回收所产生的植酸酶。

18.根据权利要求16的方法，其中所述宿主细胞是丝状真菌宿主细胞， 且该丝状真菌宿主细胞是木霉属细胞。

19.根据权利要求18的方法，其中木霉属细胞是里氏木霉细胞。

20.用于产生权利要求1的分离的植酸酶变体的方法，所述分离的植 酸酶变体由SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列组成且具有增加的比活性，所 述方法包括步骤(a)对野生型植酸酶SEQ ID NO：1进行定点诱变或位点饱 和诱变；和(b)测定由诱变产生的植酸酶变体的比活性。